Tag-Entfernungs-Proteasen
Um die Löslichkeit zu verbessern und den Reinigungsprozess rekombinanter Proteine zu vereinfachen, fügen Forscher normalerweise Fusionsmarker hinzu, von denen häufig His-Tag, Maltose-bindendes Protein (MBP) und Glutathion-S-Transferase (GST) verwendet werden.
Obwohl es als zusätzliche Proteinsequenz markiert ist, sollte es entfernt werden, um die biologische Aktivität in der Pharmaindustrie aufrechtzuerhalten. Die Entfernung von Fusionsmarkierungen erfordert ortsspezifische Proteasen wie Enterokinase (EK), Thrombin, Tabakätzvirus-Protease (TEVp), humane Rhinovirus-Protease 3C (HRV3C), kleine Ubiquitin-modifizierende Protein-Protease (SUMO), Tabakvenenfleckenvirus-Protease (TVMV) und Carboxypeptidase A/B (CPA/CPB).
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Typ
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Enzym
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Anerkennungsseite
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Endoproteasen zur Markierungsentfernung
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Enterokinase (EK), Enteropeptidase
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DDDDK↓
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Thrombin
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LVPR↓GS
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TEV-Protease
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ENLYFQ↓G
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HRV3C-Protease
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LEVLFQ↓GP
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SUMO-Protease
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SUMO-Tertiärstruktur
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TVMV-Protease
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ETVRFQG↓S
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Exoproteasen zur Markierungsentfernung
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Carboxypeptidase A (CPA)
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C-terminale Aminosäuren, außer Pro, Lys und Arg
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Carboxypeptidase B (CPB)
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C-terminales Lys und Arg
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Andere Proteasen
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Anwendungs-
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Enzym
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Funktion
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Andere Proteasen
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Protease K
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Eine Serinprotease, die Proteine durch Hydrolyse von Peptidbindungen verdaut.
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IdeS, IgG-Protease
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IgG-abbauende Enzyme (Ides), die an einer bestimmten Stelle von Immunglobulin G (IgG) spalten und dabei Fab- und Fc-Fragmente erzeugen
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IgA1-Protease
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Ein proteolytisches Enzym, das eine spezifische Stelle in der Scharnierregionsequenz des menschlichen Immunglobulins A1 (IgA1) spaltet.
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Nuklease
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Anwendungs-
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Enzym
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Funktion
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Nuklease
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Nuklease
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Spaltt Nukleinsäuren (DNA oder RNA) durch Hydrolyse der Phosphodiesterbindungen.
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Enzym einschränken
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Eine Endonuklease, die DNA an oder in der Nähe bestimmter Stellen spaltet.
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Amidase
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Anwendungs-
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Enzym
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Funktion
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Amidase
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PNGase F
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Spaltt zwischen den innersten GlcNAc- und Asparaginresten von mannosereichen, hybriden und komplexen Oligosacchariden.
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Yaohai Bio-Pharma bietet CDMO-Komplettlösung für enzymatische Reagenzien
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