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Tag-freie Proteinzubereitung

Tag-freie Proteinzubereitung Deutschland

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Tag-freie Proteinzubereitung

Protein-Tags, die als Fusionspartner in rekombinanten DNA-Technologien verwendet werden, ermöglichen eine effektive Affinitätsreinigung in einem Schritt für verschiedene Proteine/Peptide mit unterschiedlichen Eigenschaften. Trotz dieses wichtigen Vorteils können Tags als exogene Aminosäuren die Proteinstruktur und biologischen Funktionen verändern. Aus Sicherheits- und Wirksamkeitsgründen sind daher nicht-markierte (tag-freie) Proteine ​​oder Peptide vorzuziehen, insbesondere im biopharmazeutischen Bereich. Für ein rekombinantes Protein mit einem Fusions-Tag gibt es nur begrenzte Möglichkeiten, eine Zulassung von medizinischen/medikamentösen Behörden zu erhalten.

Basierend auf der F&E-Plattform für mikrobielle Biologika bietet Yaohai Bio-Pharma maßgeschneiderte, nicht markierte (tag-freie) Proteinpräparationsdienste an, die auf die Erfüllung einzigartiger Ziele für Forschung, Entwicklung und Herstellung für den klinischen Einsatz ausgerichtet sind.

Schlüsselwörter: tagfreie Proteinproduktion, Reinigung nicht-markierter Proteine, freie tagbasierte Proteinpräparation, taglose Proteinexpression und -reinigung, hochgradig tagfreies Zielprotein 

Anwendung: Humanmedizinische Forschung, Entwicklung von Tierarzneimitteln, Entwicklung rekombinanter Impfstoffe, Produktion rekombinanter Biologika mit großen Molekülen

Unsere mikrobielle F&E-Plattform

Wir verfügen über Erfahrung in der mikrobiellen Stammentwicklung, Fermentation und Produktreinigung.

Bakterien: Escherichia coli (E. coli)

Hefe: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Benutzerdefinierte Optionen
Modalität Rekombinantes Protein
Ausgangsmaterialien Gensequenzen, rekombinante Plasmide oder gentechnisch veränderte Stämme
Leistungen Reinheit: >80 %, >85 %, >90 % Menge: 0.2–10 g (wird vom Projekt bestimmt)
Expressionssystem und Bildung

E. coli periplasmatische Sekretion, lösliche und Einschlusskörper-Expression;

Intrazelluläre oder sekretorische Expression der Hefe

Analysemethoden Ultraviolett (UV), Bicinchoninsäure-Assay (BCA), Bradford oder Lowry für Quantität
Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-PAGE) für Reinigungstests
Optional: Western Blot (WB), Enzymimmunoassay (ELISA), Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC)
Restverunreinigungen Endotoxin (optional)
Service Details

Dienstleistungen

Service Details

Minimaler Zeitrahmen (Arbeitstag)

Gensynthese

Codon-Optimierung für spezifischen Expressionswirt

7 ~ 10 Tag

Gensynthese

Plasmid-/Vektorkonstruktion

Klonen in Plasmid/Vektor

2 Tage

Plasmidtransformation

Verifizierung durch Polymerase-Kettenreaktion (PCR), Restriktionsenzymverdau, Gensequenzierung

3 Tage

Proteinexpression in E. coli

Plasmidtransformation,

2 Tage

Kultivierung im Schüttelkolben

3 Tage

7L-Sackgärung, Optimierung

4 Tage/Charge

Tag-freie Proteinreinigung, Optimierung

5 ~ 10 Tage / Charge

Prüfung mittels Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-PAGE)

Proteinexpression in Hefe

Vorbereitung kompetenter Hefezellen

4 Tage

Plasmidlinearisierung und Elektrotransformation

7L-Sackgärung, Optimierung

5 Tage

Tag-freie Proteinreinigung, Optimierung

7 Tage/Charge

Tag-freie Proteinreinigung

5 ~ 10 Tage / Charge

Qualitätskontrolle durch SDS-PAGE

Zusätzliche Dienste (Optional)
Kostenloses Angebot erhalten

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