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Benutzerdefinierte circRNA-Synthese

Benutzerdefinierte circRNA-Synthese

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IVT RNA

Benutzerdefinierte circRNA-Synthese

Kreisförmiges mRNA (circRNA) wird weitgehend bei der Untersuchung von Gen- oder Proteinfunktionen eingesetzt. Gleichzeitig ist es beliebt bei der Entwicklung präventiver und therapeutischer Biologika, ähnlich wie mRNA.

Yaohai Bio-Pharma hat eine Reihe von circRNA-Synthesetechnologien entwickelt, um hochwertige RNA bereitzustellen, wie Sequenzdesign und -optimierung, in vitro Transkription (IVT), Zirkularisierung/Zyklisierung, Reinformung und Lipidnanopartikel (LNP)-Kapselierung. Alle Produkte werden unter strengen Qualitätskontrollstandards (QC) freigegeben.

CircRNA-Anwendungen

Im Vergleich zu linearer mRNA ist circuläre RNA (circRNA) strukturell stabiler und stellt einen der Hauptthemenkreise in der aktuellen Forschung zu Nukleinsäuremedikamenten dar. Sie hat eine breite Anwendung in verschiedenen Bereichen, sei es als codierende circRNA oder nicht-codierende circRNA, einschließlich prophylaktischer Impfstoffe gegen Infektionskrankheiten, therapeutischer Onkologieimpfstoffe, therapeutischer Onkologiemittel, Eiweißersatztherapie, regenerativer Medizin, Zell- und Gentruppentherapie (CGT), molekularer Schwammfunktion und RNA-Aptamer.

Service Details
Prozess Optionale Dienstleistungen Service Details Lieferzeit (Tag)
design und Optimierung von circRNA-Sequenzen Design und Optimierung von Codesequenzen CDS-Codonoptimierung 1
Entwurf und Optimierung von nicht kodierenden Sequenzen Intron- und Exon-Sequenz, homologer Arm und Spacer-Design und -Optimierung 1-2
Vorbereitung zirkulärer Plasmide Gen-Synthese Gensch Synthese (Drittanbieter) 7 bis 10
Plasmidvermehrung Plasmidvermehrung 2
Plasmidextraktion
Präparation von linearisierten Plasmiden Linearisierung und Reinigung von Plasmiden Plasmidlinearisierung 1
Reinigung von linearisiertem DNA
In-vitro-Transkription und Zyklisierung In-vitro-Transkription und Zyklisierung In-vitro-Transkriptions- und Zyklisierungsreaktionen 1-2
RNase R Verdauung
Optimierung - optional Reaktionszusammensetzung, Zeitoptimierung 2-5
circRNA-Reinigung Konventionelle Reinigungs methode Lithiumchlorid-Fällung 1
Magnetperlenreinigung 1
Sehr reine circRNA-Reinigung Präparative Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) 1-2
Pufferaustausch Ultrafiltration 1
circRNA-Lyophilisierung Probenfüllung Füllung 2-3
Lyophilisierung Vorfrieren
Primärtrocknung (Sublimation)
Sekundärtrocknung (Desorption)
circRNA-LNP Encapsulation LNP-Kapselung Material- und Flüssigkeitsvorbehandlung 2
Mikrofluidikmischung
Pufferaustausch Tangentialflussfiltration 1
Sterilisieren Filtration
Qualitätskontrolle von Plasmid-DNA Konzentration/Reinheit Ultraviolett (UV) Spektrophotometrie 1-2
Plasmidkonformation Agarose-Gel-Elektrophorese (AGE)
Kapillarelektrophorese (CE) - Optional
Plasmid identifizieren Restriktionsenzyme Identifizierung/AGE
Qualitätskontrolle von circRNA Konzentration/Reinheit Ultraviolett (UV) Spektrophotometrie -
Reinheit Agarose-Gel-Elektrophorese (AGE)/E-Gel 0.5
HPLC - optional 1
Qualitätskontrolle von circRNA-LNP Einkapselungseffizienz RiboGreen-Methode 1
Partikelgröße Dynamische Lichtstreuung (DLS) 1
Polydisperositätsindex Dynamische Lichtstreuung (DLS) 1
Zetapotential Dynamische Lichtstreuung (DLS) 1
Zellbasiertes Wirkstoff-Assay Zelltransfektion Zellplattierung, Zelltransfektion 4
Erkennung des Zielproteins Fluoreszenzbeobachtung, Western Blot/ELISA 1-3
Fallstudie

Wir haben circRNA mit verstärktem grün fluoreszierendem Protein (eGFP circRNA), mCherry circRNA und Luciferase circRNA in 293T-Zellen transfektiert und das Zielprotein mittels Fluoreszenz, Leucht- oder Farbsignal sowie Western Blot (WB) und enzyme-gelenkter Immunsorbentenassay (ELISA) detektiert.

Zellbasierte Wirksamkeitsassays von circRNA-Proben durch Yaohai Bio-Pharma

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