Die durch in vitro Zyclisierung und RNase R-Anreicherung erhaltenen Produkte müssen weiter von der in vitro Transkription (IVT) freigestellt werden, einschließlich nicht verbrauchter Substrate im Zyclisierungsreaktion, Reaktionsnebenprodukte und gespaltenes RNA.
Yaohai Bio-Pharma verfügt über reife LiCl-Sedimentations-, Magnetbeere-Reinigungs-, selbst entwickelte Reinigungs- und andere diversifizierte Reinigungslösungen, um verschiedene Verunreinigungen effektiv zu entfernen und hochreines circRNA herzustellen.
Reinigungslösung für geringe Mengen an circRNA für Zelltransfektion und als Teil tierexperimenteller Studien.
Reinigungslösung für geringe Mengen an circRNA für Zelltransfektion und als Teil tierexperimenteller Studien.
Anwendungsszenarien mit höherer Qualität;
Stabil und skalierbarer Reinigungsprozess, um GMP-Produktionsanforderungen zu erfüllen.
Prozess | Optionale Dienstleistungen | Service Details | Lieferzeit (Tag) | Liefergegenstände |
circRNA-Reinigung | Konventionelle Reinigungslösung | Lithiumchlorid-Fällung | 1 | circRNA-Wirkstoff |
Magnetperlenreinigung | ||||
Sehr reine circRNA-Reinigung | Präparative Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) | 1-2 | ||
Pufferaustausch | Ultrafiltration | 1 | ||
circRNA-Qualitätskontrolle | Konzentrieren/Reinigen | Ultraviolett (UV) Spektrophotometrie | 0.5 | Testbericht |
Reinheit | Agarose-Gel-Elektrophorese (AGE)/E-Gel | |||
HPLC - optional | 1 |
Anwendungsszenarien können realisiert werden.
circRNA mit einer Reinheit von über 90%;
Durch strenge Kontrolle von RNasen in der Experimentumgebung und den Verbrauchsmaterialien wird die Degradation von RNA wirksam verhindert.
Yaohai Bio-Pharma hat eine reife circRNA-Reinigungslösung entwickelt, die verschiedene prozessbezogenen Verunreinigungen effektiv entfernen kann.
Die durch die konventionelle Lösung gereinigten circular RNA Produkte sind immer noch offensichtlich mit gespaltenem RNA und Introns vermischt.
Nach der von Yaohai Bio-Pharma entwickelten Reinigungslösung können verschiedene lineare RNA-Verunreinigungen, wie gespaltene RNA und Introns, erfolgreich entfernt werden.
validierung der circRNA-Expression
Mit einem konventionellen Liposom wird purifiziertes eGFP circRNA in 293T-Zellen transfektiert, und nach 24 Stunden wird ein Fluoreszenzsignal beobachtet, das nach 48 Stunden weiter ansteigt. Das Fluoreszenzsignal kann auch am 7. und 14. Tag nach der Transfektion noch detektiert werden.