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entwicklung von mRNA-Plasmiden

entwicklung von mRNA-Plasmiden

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entwicklung von mRNA-Plasmiden

Plasmid-DNA, als in vitro transkription (IVT) Vorlage, ist ein wichtiges Rohmaterial für die Herstellung von mRNA. Hohe Ausbeute, hohe Reinheit und hohe Erholung von Plasmid-DNA sind die Hauptaspekte ziel während der Plasmid-Prozessentwicklung.

Yaohai Bio-Pharma bietet eine umfassende Lösung für die Plasmid-Entwicklung, einschließlich Aufstrom (Fermentation), Abstrom (Reinigung) Prozessentwicklung, Prozesscharakterisierung und Prozessvalidierung. Wir haben umfangreiche Erfahrung in der Verbesserung der Plasmid-Ausbeute und dem Isolieren aus komplexen Matrizen durch Entwicklung und Optimierung von Fermentations-, Reinigungs- und Schadstoffentfernungsschritten.

Service Details

Der grundlegende Bioprozess für die Plasmidherstellung umfasst: Escherichia coli (E. coli) fermentation, Zellharvest und alkalische Lysierung, Klarifizierung, Konzentration, dreistufigen Chromatographieprozess (Auffang, Zwischenreinigung und Polieren) und Konzentration.

Service Details Einzeloperationen Parameter
E. coli fermentation
Schüttelflasche Medienzusammensetzung, Antibiotikum, Inokulumvolumen, Wachstumstemperatur und usw.

Fermenter (7 L)

Antibiotikum, Inokulumvolumen, Wachstumstemperatur, pH, gelöster Sauerstoff (DO), Fütterungsmodus (z. B. fed-batch), Fütterungsmedium, Fermentationszeit und usw.

Zellenernte Mikrofiltration Standard E. coli ernteprozess
Zelllyse Zellresuspension, alkalische Lyse, Neutralisierung Alkaligehalt, Lysierzeit
Klärung Filtration Rohfiltration, 20 µm und eine 5 µm Filterkombination (präferiert)
Konzentration Ultrafiltration, tangentialer Flussfilter Porengröße (oder NMWC), Transmembrandruck (TMP), Fluss, Filtratvolumen zu Membranflächenumfang
Dreistufige Chromatographie Größenexklusionschromatographie (SEC) oder Gelfiltrationschromatographie (GFC) Spaltenlänge und -durchmesser, Pufferzusammensetzung, Injektionsvolumen, mobiles Phasenzusammengesetzt (Adsorption und Desorption), pH, Durchflussrate, Aushaltung, Bindung, Spülung und Elutionsbedingungen.
Affinitätschromatographie (AF)
Anionenaustauscherchromatographie (AEX)
Konzentration Ultrafiltration, tangentialer Flussfilter Porengröße (oder NMWC), Transmembrandruck (TMP), Fluss, Filtratvolumen zu Membranflächenumfang
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