ミニサークル DNA

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ミニサークル DNA (mcDNA) は、親プラスミド DNA 様構造に由来する小さな非ウイルス DNA ベクターです。ミニサークル DNA は、複製起点 (ORI) や選択マーカー (selMark) を含まず、プロモーターと対象遺伝子 (GOI) を含むという点で従来のプラスミド DNA とは異なります。ミニサークル DNA は、プラスミド DNA から余分な配列 (ミニプラスミドと呼ばれる) を除去するための in vivo 組換えによって細菌内で生成されます。ミニサークル DNA はその安全性により、遺伝子治療や DNA ワクチンなどの非ウイルスベクターとして人気を集めています。

図 1. プラスミド DNA (pDNA) とミニサークル DNA (mcDNA) の構造

ミニサークル DNA 組換えシステム

ファージ λ インテグラーゼ、ファージ P1 Cre リコンビナーゼ、ParA リゾルバーゼ、PhiC31 インテグラーゼ/I-SceI を含む XNUMX つの主要なミニサークル DNA in vivo 組換えシステムが研究されています。

戦略	ファージλインテグラーゼ	ファージ P1 Cre リコンビナーゼ	ParA リゾルバーゼ	PhiC31 インテグラーゼ/I-SceI
メカニズム	チロシンリコンビナーゼ。タンパク質FISおよびIHFを通じて機能し、attハイブリッド部位の組換えを触媒します。	部位特異的チロシンリコンビナーゼ。loxP 部位に結合するときに双方向組換えを実行します。	セリンリコンビナーゼ。2 つの同一の MRS 部位間で不可逆的かつ一方向の組換えを実行します。	セリンリコンビナーゼは attP/attB 結合部位間の一方向性組換えを媒介し、I-SceI エンドヌクレアーゼは生成物関連不純物と未組換えの親プラスミドを切断します。
特徴	宿主因子FISおよびIHFの発現に依存します。固有の毒性。残りの親プラスミドとミニプラスミド	残りの親プラスミドとミニプラスミド	高収率。残りの親プラスミドとミニプラスミド	親プラスミドの分解に伴う収量の減少

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参考文献・引用元

[1] アルメイダ AM、ケイロス JA、スーザ F、スーザ Â。ミニサークル DNA: DNA ベースのベクターの未来?トレンドバイオテクノロジー。 2020 38 月;10(1047):1051-10.1016。土井: 2020.04.008/j.tibtech.XNUMX。

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