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カスタム circRNA 合成

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IVT RNA

カスタム circRNA 合成

環状 mRNA (circRNA) は、遺伝子やタンパク質の機能に関する研究で広く使用されています。また、mRNA と同様に、予防および治療用のバイオ医薬品の開発でも人気があります。

姚海バイオファーマは、高品質な RNA を提供するための一連の circRNA 合成技術を確立しました。これには、配列設計・最適化、体外転写 (IVT)、環状化、精製、および脂質ナノ粒子 (LNP) 包接が含まれます。すべての製品は厳しい品質管理 (QC) 標準に基づいてリリースされます。

CircRNA の応用

線形mRNAと比較すると、環状RNA（circRNA）は構造的により安定であり、現在の核酸薬剤研究における主要なホットスポットです。感染症の予防ワクチン、治療用がんワクチン、治療用がん薬、タンパク質置換療法、再生医療、細胞および遺伝子療法（CGT）、分子スポンジの役割やRNAアプタマーなど、さまざまな分野で幅広い応用があります。これは、コード化されたcircRNAでも非コード化されたcircRNAでも同様です。

サービス詳細
プロセス オプションサービス サービス詳細 納期（日）
circRNA配列設計および最適化 コーディング配列の設計と最適化 CDSコドンの最適化 1
ノンコーディング配列の設計と最適化 イントロンおよびエクソン配列、ホモロガスアームおよびスペーサーの設計および最適化 1-2
円形プラミドの準備 遺伝子合成 遺伝子合成（サードパーティ） 7から10
プラミド増幅 プラミド増幅 2
プラミド抽出
線状プラミド準備 プラミドの線形化と精製 プラミド線状化 1
線状DNAの精製
体外転写とサイクル化 体外転写とサイクル化 体外転写とサイクル化反応 1-2
RNase R消化
最適化-オプション 反応組成、時間の最適化 2-5
circRNA 純化 従来の精製方法 リチウムクロライド沈殿 1
磁気ビーズによる精製 1
高純度circRNA精製 準備用高出力液体クロマトグラフィー (HPLC) 1-2
バッファー交換 限外濾過 1
circRNA リオポライゼーション サンプル充填 フィリング 2-3
リヨシタライゼーション 事前凍結
一次乾燥（昇華）
二次乾燥（脱着）
circRNA-LNP カプセル化 LNP 包裹 材料および液体の前処理 2
マイクロフローデバイスによる混合
バッファー交換 接線流れろ過 1
滅菌 濾過
プラミドDNAの品質管理 濃度／純度 紫外線（UV）分光光度計 1-2
プラミド構造 アガロースゲル電気泳動 (AGE)
キャピラリ電気泳動 (CE)-オプション
プラミドの同定 制限酵素識別/AGE
CircRNA の品質管理 濃度／純度 紫外線（UV）分光光度計 -
純度 アガロースゲル電気泳動 (AGE)/E-Gel 0.5
HPLC-オプション 1
CircRNA-LNPの品質管理 カプセル化効率 RiboGreen法 1
粒子サイズ 動的光散乱 (DLS) 1
ポリディスパージティ指数 動的光散乱 (DLS) 1
ゼータ電位 動的光散乱 (DLS) 1
細胞を用いた効力試験 細胞転染 細胞培養、細胞転染 4
標的タンパク質の検出 蛍光観察、ウェスタンブロット/ELISA 1〜3
ケーススタディ

我々は、強化緑色蛍光タンパク質circRNA（eGFP circRNA）、mCherry circRNA、ルシフェラーゼcircRNAを293T細胞に転染し、蛍光、発光、または色情報、ウェスタンブロット（WB）、酵素連鎖免疫吸着測定法（ELISA）を通じて標的タンパク質を検出しました。

Yaohai Bio-PharmaによるcircRNAサンプルの細胞を用いた効力試験

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