環状 mRNA (circRNA) は、遺伝子またはタンパク質の機能の研究に広く使用されています。一方、mRNA と同様に、予防および治療用の生物学的製剤の開発でも人気があります。
Yaohai Bio-Pharma は、配列設計と最適化、インビトロ転写 (IVT)、環状化/環化、精製、脂質ナノ粒子 (LNP) カプセル化など、高品質の RNA を提供する一連の circRNA 合成技術を確立しました。すべての製品は厳格な品質管理 (QC) 基準の下でリリースされます。
直鎖状 mRNA と比較して、環状 RNA (circRNA) は構造がより安定しており、現在の核酸医薬研究の主要なホットスポットです。コーディングcircRNAか非コーディングcircRNAかに関係なく、感染症の予防ワクチン、腫瘍治療ワクチン、腫瘍治療薬、タンパク質補充療法、再生医療、細胞および遺伝子治療(CGT)など、さまざまな分野で幅広い用途があります。 、分子スポンジの役割とRNAアプタマー。
プロセス | オプションサービス | サービスの詳細 | 配送期間(日) |
circRNA 配列の設計と最適化 | コーディングシーケンスの設計と最適化 | CDS コドン最適化 | 1 |
非コーディングシーケンスの設計と最適化 | イントロンとエクソンの配列、相同アームとスペーサーの設計と最適化 | 1-2 | |
環状プラスミドの調製 | 遺伝子合成 | 遺伝子合成 (サードパーティ) | 7-10 |
プラスミドの増幅 | プラスミドの増幅 | 2 | |
プラスミドの抽出 | |||
線状プラスミドの調製 | プラスミドの線状化と精製 | プラスミドの線形化 | 1 |
線形化 DNA 精製 | |||
インビトロ転写と環化 | インビトロ転写と環化 | In Vitro の転写および環化反応 | 1-2 |
RNase R の消化 | |||
最適化 - オプション | 反応組成、時間の最適化 | 2-5 | |
circRNAの精製 | 従来の精製方法 | 塩化リチウムの沈殿 | 1 |
磁気ビーズの精製 | 1 | ||
高純度のcircRNA精製 | 分取高速液体クロマトグラフィー (HPLC) | 1-2 | |
バッファ交換 | 限外ろ過 | 1 | |
circRNA 凍結乾燥 | サンプル充填 | 充填 | 2-3 |
凍結乾燥 | 予備凍結 | ||
一次乾燥(昇華) | |||
二次乾燥(脱着) | |||
circRNA-LNP カプセル化 | LNP カプセル化 | 材料および液体の前処理 | 2 |
マイクロ流体デバイスの混合 | |||
バッファ交換 | 接線流ろ過 | 1 | |
殺菌する | ろ過 | ||
プラスミド DNA の品質管理 | 濃度・純度 | 紫外 (UV) 分光測光法 | 1-2 |
プラスミドの立体構造 | アガロースゲル電気泳動 (AGE) | ||
キャピラリー電気泳動 (CE) - オプション | |||
プラスミドの識別 | 制限酵素の同定/AGE | ||
circRNAの品質管理 | 濃度・純度 | 紫外 (UV) 分光測光法 | - |
お肌にいいもの | アガロースゲル電気泳動(AGE)/E-ゲル | 0.5 | |
HPLC-オプション | 1 | ||
circRNA-LNPの品質管理 | カプセル化効率 | リボグリーン法 | 1 |
粒径 | 動的光散乱 (DLS) | 1 | |
多分散性指数 | 動的光散乱 (DLS) | 1 | |
ゼータ電位 | 動的光散乱 (DLS) | 1 | |
細胞ベースの効力アッセイ | 細胞トランスフェクション | 細胞プレーティング、細胞トランスフェクション | 4 |
標的タンパク質の検出 | 蛍光観察、ウェスタンブロット/ELISA | 1-3 |
強化緑色蛍光タンパク質 circRNA (eGFP circRNA)、mCherry circRNA、ルシフェラーゼ circRNA を 293T 細胞にトランスフェクトし、蛍光、発光または色シグナル、ウェスタンブロット (WB)、酵素結合免疫吸着検定法 (ELISA) によって標的タンパク質を検出しました。
Yaohai Bio-Pharma による circRNA サンプルの細胞ベースの効力アッセイ