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mRNA共転写キャッピング

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IVT RNA

mRNA共転写キャピング

二段階の酵素によるキャピングと比較すると、一歩法の共転写キャピングはプロセスを大幅に簡略化できます。この方法は結果指向であり、体外転写（IVT）反応にキャップアナログを添加することを含みます。キャップアナログは転写開始時に導入でき、転写が完了した時点でキャップ構造を持つmRNAを得ることができます。現在の第三代キャップアナログは逆キャピングを回避し、直接Cap 1構造を転写産物に追加することができます。

MRNAの体内免疫原性および翻訳効率を考慮すると、IVTプロセスでは一般的に修飾されたNTPを使用し、よく使用される修飾ヌクレオチドにはプシードウリジン（Ψ）、N1-メチル-プシードウリジン（N1Ψ）、5-メチルサイトシン（5mC）があります。

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図：mRNA共転写およびキャピング反応の図

サービス詳細

サービス

サービス詳細

納期（営業日）

共転写キャピング

体外転写応答 (Clean Capアナログ) 1-2
核酸修飾 (Ψ/N1Ψ/5mC)
DNAテンプレートの除去 (DNase I)

IVT条件の最適化 - オプション

反応成分の設計と最適化 3-7
私たちの特徴
  • 多様な核酸修飾戦略

複数のオプション可能な核酸修飾戦略は、タンパク質の発現を向上させることができます。

  • 最適化された反応システム

高い転写効率と高いキャッピング効率を達成します。

  • 安定したキャッピングプロセス

95%以上のキャピング率を達成する。

  • RNaseの厳格な管理

実験環境や消耗品におけるRNaseの厳密な管理により、mRNAの劣化を効果的に防止します。

ケーススタディ

Yaohai Bio-Pharmaは、成熟した共転写キャピングプロセスプラットフォームを構築しました。クリーンなキャップアナログを使用して、逆キャピングを回避しながらCap1構造を直接追加します。標準的なサンプル前処理とキャピラリエレクトロフォーレス（CE）検出後、強化緑色蛍光タンパク質（eGFP）mRNAのキャピング率は95%以上に達します。

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eGFP mRNAのキャピング効率は95%以上

共転写キャピングで準備されたeGFP mRNAおよびmCherry mRNAをそれぞれ293T細胞に転染し、48時間後に強い蛍光信号が観察されました。これは、mRNAが293T細胞で効率的に発現していることを示しています。

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293T細胞におけるeGFP mRNAおよびmCherry mRNAの発現

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