たんぱく質タグは、再構成DNA技術で使用される融合パートナーとして、さまざまな特性を持つたんぱく質/ペプチドの有効な一歩のアフィニティ精製を可能にします。この重要な利点にもかかわらず、タグは外来のアミノ酸であり、たんぱく質の構造や生体機能を変える可能性があります。したがって、特にバイオ医薬品分野では、安全性と効果を確保するために、タグなし(タグフリー)のたんぱく質やペプチドがより好まれます。融合タグ付きの再構成たんぱく質は、医療/薬物管理機関からの承認を得る可能性が制限されています。
微生物バイオロジクスのR&Dプラットフォームに基づき、ヤオハイバイオファーマは、臨床使用のための研究、開発、製造における独自の目的を達成するためのカスタマイズされたタグなし(タグフリー)たんぱく質準備サービスを提供しています。
キーワード: タグフリーのタンパク質生産、ノンタグタンパク質精製、タグを用いないタンパク質準備、タグなしのタンパク質発現と精製、高純度タグフリーターゲットタンパク質
用途: 人間医学研究、動物医学開発、再構成ワクチン開発、再構成大分子バイオ医薬品生産
我々は微生物株設計、発酵、および製品精製において豊富な経験を持っています。
細菌: エシュペリア・コリ(E. coli)
酵母: ピチア・パストリス(P. pastoris)、サッカロミセス・セレビシエ(S. cerevisiae)、ハンセンラ・ポリモルファ(H. polymorpha)
モダリティ | 再構成タンパク質 |
開始材料 | 遺伝子配列、再構成プラスミド、または設計された株 |
納品物 | 純度: >80%, >85%, >90% 量: 0.2~10 g (プロジェクトによって決定) |
発現システムと形態 |
E. coli ペリプラズム分泌、可溶性および包含体発現; イーストの細胞内または分泌発現 |
分析方法 |
紫外線(UV)、ビシン酸法(BCA)、ブラッドフォード、またはロウリー法で量を測定 十二炭素硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)で純化試験 オプション: ウェスタンブロット(WB)、酵素連鎖免疫吸着測定法(ELISA)、高速液体クロマトグラフィー(HPLC) |
残留する不純物 | エンドトキシン(オプション) |
サービス一覧 |
サービス詳細 |
最小納期(営業日) |
遺伝子合成 |
特定の発現ホスト向けのコドン最適化 |
7~10日 |
遺伝子合成 |
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プラスミド/ベクター構築 |
プラスミド/ベクターへのクローニング |
2日間 |
プラスミド変形 |
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ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)検証、制限酵素分解、遺伝子配列決定 |
3日 |
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タンパク質の発現について E. coli |
プラスミド変形、 |
2日間 |
シェイクフラスコでの培養 |
3日 |
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7L規模の発酵、最適化 |
4日/バッチ |
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タグフリーのタンパク質精製、最適化 |
5~10日/バッチ |
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十二炭素重硫化ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)による試験 |
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酵母におけるタンパク質の発現 |
酵母感受性細胞の準備 |
4日 |
プラミドの線形化と電気透入 |
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7L規模の発酵、最適化 |
5日 |
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タグフリーのタンパク質精製、最適化 |
7日間/バッチ |
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タグフリーのタンパク質精製 |
5~10日/バッチ |
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SDS-PAGEによる品質管理 |