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N-グリコシレーショｎサイト占有

N-グリコシレーショｎサイト占有

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微生物CDMO

N-グリコシレーショｎサイト占有

N-グリコシレーショングサイト占有は、グリコタンパク質の生理的特性であり、主にN-グリカンを生成します。ヤオハイ・バイオファーマのN-グリコシレーショングサイト占有解析サービスは、消化、放出、濃縮を行い、液相クロマトグラフィー-エレクトロスプレーイオン化質量分析法-質量分析法（LC-ESI-MS/MS）を使用して解析を行います。

私たちは、再構成サブユニットワクチン、ナノボディ/VHH/単一ドメイン抗体（sdAbs）、抗体断片、ホルモン/ペプチド、サイトカイン、成長因子（GF）、酵素、コラーゲンなどを含む様々な大型分子のタンパク質構造特性評価に携わってきました。

N-グリコシレーショングサイト占有に関する規制要件

ICH Q6Bガイドラインによると、「グリコタンパクの場合、炭水化物含量（中性糖、アミノ糖およびサリル酸）が決定される。さらに、炭水化物鎖の構造、オリゴ糖パターン（アンテナプロフィール）、およびポリペプチド鎖のグリコシレーション部位が可能な限り分析される」とされている。

分析方法
分析 方法
N-グリコシレーショｎサイト占有 脱グリコシダーゼおよびプロテアーゼ消化後のLC-MS
手続き

1. タンパク質を小規模なペプチド断片に分解するためのタンパク質消化。

2. エンドグルコシダーゼHまたはPNGase Fを使用したN-グリカンの放出。エンドグルコシダーゼHはN-結合型グリカンのコアにある2つのGlcNAc残基間の結合を切断し、一方PNGase FはGlcNAcとAsnの結合を切断して全体の糖鎖を解放し、Asnを1-Da質量増加のAspに変換する。

3. HILIC（ヒドロフィリックインタラクション液状クロマトグラフィー）によるN-グリコペプチドの濃縮。

4. LC-ESI-MS/MSを使用したN-結合型グリコシレーションサイト占有の解析。

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