N-グリコシレーショングサイトの解析は、グリカンの機能を理解する上で重要です。要海バイオファーマでは、酵素分解後に液体クロマトグラフィー-質量分析法(LC-MS)を使用してN-グリコシレーショングサイトを解析します。
私たちは、再構成サブユニットワクチン、ナノボディ/VHH/単一ドメイン抗体(sdAbs)、抗体断片、ホルモン/ペプチド、サイトカイン、成長因子(GF)、酵素、コラーゲンなどを含む様々な大型分子のタンパク質構造特性評価に携わってきました。
ICH Q6Bガイドラインによると、「糖タンパクの場合、炭水化物含有量(中性糖、アミノ糖およびサリル酸)が決定される。さらに、炭水化物鎖の構造、オリゴ糖パターン(アンテナプロファイル)、およびポリペプチド鎖のグリコシレーショングサイトが可能な限り解析されるべきである」。
分析 | 方法 |
N-グリコシレーショnサイト | 酵素分解後の液体クロマトグラフィー-質量分析法 (LC-MS) |
1. トリプシンまたは他のプロテアーゼを使用したタンパク質の酵素分解
2. 断片化されたグリコペプチドを分離する
3. LC-MSによってN-グリコシレーショングサイトを確認する
4. データを解析する