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LC-MSを使用したタンパク質質量分析

LC-MSを使用したタンパク質質量分析

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微生物CDMO

タンパク質分子量分析

LC-MSによる分子量測定

完全な分子量は、常にバイオ医薬品の重要な特性として認識されています。完全分子量分析は、タンパク質／ペプチド製品を示すために使用され、バイオ医薬品を検証します。分子量を測定することは規制ガイドラインの要件です。

ヤオハイバイオファーマでは、ネイティブ条件、還元条件、N-デグリコシレート条件での完全分子量分析を提供しています。我々は、液状クロマトグラフィー質量分析法（LC-MS）を用いて完全分子量を決定します。

分子量に関する規制要件

ICH Q6において、「分子量（またはサイズ）は、ゲルろ過クロマトグラフィー、SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動（還元および非還元条件下）、質量分析法（MS）、その他の適切な技術を用いて測定されるべきである」と推奨されています。

分析方法
分析 方法
分子量 天然のタンパク質、還元されたタンパク質、N-デグリコシレートされたタンパク質またはサブユニットのLC-MS／液体クロマトグラフィー・エレクトロスプレー質量分析法 (LC／ES-MS)
分析手順

完全分子量：

  • 受け取った天然サンプルに対してLC-MSを実施する。
  • LC-MSデータ解析。

還元分子量：

  • 適切な還元剤でタンパク質サンプルを処理する；
  • 還元されたタンパク質に対してLC-MSを実施する；
  • LC-MSデータ解析。

N-デグリコシレート分子量：

  • 適切な酵素を使用してN-糖鎖を除去する；
  • N-デグリコシル化されたタンパク質でのLC-MSの実行;
  • LC-MSデータ解析。

還元され、N-デグリコシル化された分子量:

  • 適切な還元剤でタンパク質サンプルを処理する；
  • 適切な酵素を使用してN-糖鎖を除去する；
  • 還元され、N-デグリコシル化されたタンパク質でのLC-MSの実行;
  • LC-MSデータ解析。

タンパク質サブユニットの分子量:

  • サブユニットの切断
  • タンパク質サブユニットでのLC-MSの実行
  • LC-MSデータ解析
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