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mRNA生成のための酵素

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RNA生成のための酵素

長鎖RNA生成のための重要な酵素

mRNAは、長コードRNAの一種として、COVID-19の流行中に幅広い人々に対して安全かつ効率的に機能しました。自己増幅RNA（saRNA）や環状mRNA（circRNA）などの他の長コードRNAも、前臨床研究および臨床研究で有効性を示しました。

ロングコーディング RNA の大規模生産は、いくつかの酵素反応による in vitro 転写 (IVT) に依存しています。RNA 生産の手順には、テンプレート DNA の準備、IVT RNA 合成、循環、DNA 除去、RNA 修飾 (キャッピングとテーリング)、および RNA 精製が含まれます。

長いコードを持つ RNA の生成 (mRNA、saRNA、circRNA など) には、制限エンドヌクレアーゼ、T7 RNA ポリメラーゼ (T7 RNAP)、RNase 阻害剤、無機ピロホスファターゼ、DNase I、ワクシニアキャッピング酵素、RNase R など、いくつかの重要な酵素が使用されます。

プロセス

酵素

演算

テンプレートDNAの準備

制限エンドヌクレアーゼ

より長い転写産物の生成を避けるためのプラスミド DNA (pDNA) の直線化。

IVT RNA合成

T7 RNA ポリメラーゼ (T7 RNAP)

T7 プロモーターに結合し、特定の RNA 転写産物を生成します。IVT 反応中に重要な役割を果たします。

RNase阻害剤、組み換え

IVT反応中のRNase活性を阻害します。

無機ピロホスファターゼ（iPPase）

IVT 反応中のピロリン酸を防止します。

DNA除去

DNアーゼI

DNA テンプレートを削除します。

RNA修飾

ワクシニアキャッピング酵素

IVT mRNA の 1′ 末端に Cap5 構造を追加します。

2'-O-メチルトランスフェラス

circRNA濃縮

RNase R

直鎖状 RNA を消化し、環状 RNA を濃縮します。
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