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ホーム > モダリティ > タンパク質 > 組換え酵素 > mRNA生成のための酵素
mRNAは、長コードRNAの一種として、COVID-19の流行中に幅広い人々に対して安全かつ効率的に機能しました。自己増幅RNA（saRNA）や環状mRNA（circRNA）などの他の長コードRNAも、前臨床研究および臨床研究で有効性を示しました。
ロングコーディング RNA の大規模生産は、いくつかの酵素反応による in vitro 転写 (IVT) に依存しています。RNA 生産の手順には、テンプレート DNA の準備、IVT RNA 合成、循環、DNA 除去、RNA 修飾 (キャッピングとテーリング)、および RNA 精製が含まれます。
長いコードを持つ RNA の生成 (mRNA、saRNA、circRNA など) には、制限エンドヌクレアーゼ、T7 RNA ポリメラーゼ (T7 RNAP)、RNase 阻害剤、無機ピロホスファターゼ、DNase I、ワクシニアキャッピング酵素、RNase R など、いくつかの重要な酵素が使用されます。
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プロセス |
酵素 |
演算 |
|
テンプレートDNAの準備 |
制限エンドヌクレアーゼ |
より長い転写産物の生成を避けるためのプラスミド DNA (pDNA) の直線化。 |
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IVT RNA合成 |
T7 RNA ポリメラーゼ (T7 RNAP) |
T7 プロモーターに結合し、特定の RNA 転写産物を生成します。IVT 反応中に重要な役割を果たします。 |
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RNase阻害剤、組み換え |
IVT反応中のRNase活性を阻害します。 |
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無機ピロホスファターゼ（iPPase） |
IVT 反応中のピロリン酸を防止します。 |
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DNA除去 |
DNアーゼI |
DNA テンプレートを削除します。 |
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RNA修飾 |
ワクシニアキャッピング酵素 |
IVT mRNA の 1′ 末端に Cap5 構造を追加します。 |
|
2'-O-メチルトランスフェラス |
||
| circRNA濃縮 | RNase R | 直鎖状 RNA を消化し、環状 RNA を濃縮します。 |
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