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mRNA配列設計

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IVT RNA

mRNA配列設計

中心法則によれば、伝達RNA（mRNA）はDNAからタンパク質への遺伝物質の伝達を橋渡しする役割を果たします。

mRNAは体内でタンパク質をエンコードすることにより生物学的役割を果たし、真核生物における成熟したmRNAは5つの構成要素で構成されています：5'キャップ（キャップ構造）、5' UTR（非翻訳領域）、ORF（オープンリーディングフレーム）、3' UTR、および3'ポリア尾巴（ポリアデニル化尾巴）。

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サービスの詳細
プロセス オプションサービス サービス詳細 納期（日）
mRNA配列設計および最適化 コーディング配列の設計と最適化

CDS配列のアラインメント

CDSコドンの最適化

1
ノンコーディング配列の設計と最適化

5' UTR配列の設計と最適化

3' UTR配列の設計と最適化

polyA配列の設計と最適化

1-2
設定可能なオプション
5' UTR／3' UTR
  • 天然のUTR配列
  • 突然変異/設計されたUTR配列
3' ポリAテール
  • 100A～120A ポリ(A) 尾部（推奨）
  • セグメント化されたポリ(A) 尾部
  • その他のカスタム尾部
MRNA配列設計の一般的な戦略
mRNAの構成要素 生物学的機能 最適化戦略
5’ キャップ エキソヌクレアーゼによる分解からmRNAを保護し、3'末端のポリAテール、ポリA結合タンパク質および翻訳開始因子タンパク質と協力してタンパク質の翻訳を開始します。 自然なCap1構造はパターン認識受容体を回避し、したがって自然免疫応答を低下させます。これは一ステップの共転写キャッピングまたは二ステップの酵素キャッピングによって達成できます[詳細はmRNA酵素キャッピングおよび共転写キャッピングを参照]。
5’ UTR 5' UTRはリボソームによって認識され、mRNAの翻訳を調整し、mRNAの安定性に影響を与えます。 非常に安定した二次構造を持たないコザック配列を含みます。高発現遺伝子の自然なUTR（例えばαグロビンやβグロビン）は、体外転写（IVT）mRNAに好ましいです。
CDS タンパク質をコードする領域と、抗原、抗体、またはその他の機能的タンパク質のための配列。 コドン最適化は翻訳のレベルを向上させるが、特定の非最適コドンがタンパク質の折りたたみに役割を果たすことがあることに注意。
3' UTR MRNAの翻訳と安定性を調節する。 Α-グロビンやβ-グロビンのように、高発現遺伝子の自然なUTRがIVT mRNAに好ましい。
3’ ポリAテール タンパク質の発現を調節し、キャップ構造を分解から保護する。 十分な長さ（100-150 bp）が必要である。転写テンプレートプラスミド上でポリAテールをエンコードすることで、より定義されたポリAテールの長さを確保できる。
私たちの特徴
  • 多様なUTRソースの選択

高発現する自然および変更されたUTRライブラリの複数のソース；成熟したUTRの修飾戦略；

  • 最先端のCDS最適化チーム

専門的なAIアルゴリズムチームと協力して、コドンの最適化を完了します。

  • 均一なポリAテール分布

DNAテンプレートに基づいてポリA配列を追加し、mRNAの長さをより正確に制御します。

  • 多様な最適化コンビネーション

低免疫原性を持つmRNAの効率的な発現を実現します。

ケーススタディ

二重レポーターmRNAのシーケンスデザイン: mCherry-eGFP mRNA

YaoHai Bio-PharmaのmRNAサービスは、二重レポーター遺伝子のタンデムシーケンスの設計と最適化により、二つの遺伝子の共発現を達成する形で引き続きアップグレードされています。

従来のトランスフェクション試薬を使用して、mCherry-eGFP mRNAを293T細胞にトランスフェクトし、48時間後にmCherry（赤）および強化緑色蛍光タンパク質（eGFP）の2つの蛍光信号が同時に発現していることが検出され、積み上げグラフでは黄色で強調表示されます。

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293T細胞におけるmCherry-eGFP mRNAの発現

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