5'末端キャピングはmRNAの必須修飾です。キャップ構造、特にCap1構造を持つmRNAは、体内で先天的免疫応答を回避し、効率的なタンパク質翻訳を促進します。
酵素キャピング(二段階法)は、真核生物におけるキャピングプロセスに類似した伝統的なmRNAキャピング方法です。一連の酵素の作用により、7-メチルグアニン(m7G)が5'-末端に5'-5' トリリン酸結合で結びつき、メチル化修飾を経てCap 1 (m7GpppN) 構造を形成します。

自然なキャップ構造形成の図
酵素キャピング反応の流れは次の通りです:
線形化されたプラミドDNAをT7ポリマーを使って体外転写(IVT)のテンプレートとし、ワクシニアキャッピング酵素および2'-O-メチルトランスフェラーゼを使用して一歩の精製後に5'末端キャップ構造を持つmRNAが形成されます。

サービスの詳細
オプションサービス |
サービス詳細 |
納期(日) |
mRNAの酵素によるキャッピング |
酵素によるキャピング反応 |
1 |
キャピング反応の最適化 - オプション |
反応成分の設計と最適化 |
3~7 |
私たちの特徴
キャピング反応成分が最適化され、mRNA転写産物の生成が大幅に増加しました。
キャップ付きmRNAを293T細胞にトランスフェクトし、標的タンパク質の発現を検出することができます。
実験環境や消耗品におけるRNaseの厳格な管理により、mRNAの分解が効果的に防止されています。
ケーススタディ
Yao Hai Bio-PharmaのmRNAプラットフォームは、完璧なキャピング反応プロセスを構築しています。
EGFP mRNAの場合、酵素によるキャピング処理が施されたmRNA前駆体を使用し、293T細胞に転染して24時間後に高いレベルでeGFP蛍光信号(緑色蛍光)を観察できます。これはWestern Blot (WB)で検出され、標的タンパク質である増強型緑色蛍光タンパク質(eGFP)が体外で効率的に発現されることを示しています。


酵素キャピング処理されたeGFP mRNAの293T細胞における発現