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インビトロ転写、IVT

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IVT RNA

IVT、インビトロ転写

mRNA の大量生産に関しては、in vitro 転写 (IVT) がより効率的で成熟した方法です。IVT 反応では、T7 プロモーターを含む線状プラスミド DNA をテンプレートとして採用し、T7 RNA ポリメラーゼの存在下でヌクレオシド三リン酸 (NTP) を基質として mRNA を合成します。

ヌクレオチド修飾は mRNA の探究における画期的な進歩であり、修飾されていない mRNA 分子が細胞内 RNA センサーによって認識され、自然免疫が活性化されます。mRNA の生体内免疫原性と翻訳効率を考慮すると、IVT プロセスでは通常、特定の種類の修飾 NTP が使用され、一般的な修飾ヌクレオチドはシュードウリジン (Ψ)、N1-メチルシュードウリジン (N1Ψ)、および 5-メチルシトシン (5mC) です。

未定義

mRNAのin vitro転写プロセス

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インビトロ転写（IVT）反応図

サービス詳細
オプションサービス
サービスの詳細
配達期間（平日）
インビトロ転写（IVT）
IVT、インビトロ転写1
ヌクレオチド修飾（Ψ/N1Ψ/5mCなど）
DNA テンプレートの除去 (DNase I)
IVT条件最適化 - オプション
IVT反応コンポーネントの設計と最適化2-5
私たちの特徴
  • 多様なヌクレオチド修飾戦略

生体内での mRNA の安定性とタンパク質の発現を改善します。

  • 厳格なテスト設計と最適化

最大10kbのmRNA断片の調製が可能です。

  • 効率的な転写

IVT 反応条件を最適化することで、転写率は最大 1:200 になります。

  • RNaseの厳格な管理

実験環境と消耗品を通じて RNase を厳密に制御することで、mRNA の分解を効果的に防ぐことができます。

ケーススタディ

現在の IVT 反応システムは、任意の長さの mRNA ではなく、約 100 nt の長さの合成システム用に大まかに最適化されています。mRNA 配列が長くなるほど、転写が難しくなり、分解されやすくなります。

Yaohai Bio-Pharma は、長さ約 10 kb のカスタマイズされた mRNA 配列を調製するために、厳密な実験設計、反応条件の継続的な最適化、および RNase の厳格な制御を通じて、1 μg の線状化プラスミドを in vitro で転写した後、135:135 の高い転写比で高品質のサンプルを調製し、1 μg の初期精製 mRNA 産物を得ることに成功しました。

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mRNAの同定（アガロースゲル電気泳動）

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