体外転写(IVT)mRNAの準備プロセスでは、T7 RNAポリメラーゼの助けを借りてIVTの転写テンプレートとして線状化されたプラミドDNAが必要です。高品質のプラミドDNAは、体外転写にとって重要です。
成熟したプラミド準備サービスプラットフォームに基づき、妖海バイオファーマは効率的なIVT転写を実現するための高純度かつ高基準の線状化されたプラミドDNA準備サービスを提供できます。
プロセス | オプションサービス | サービス詳細 | 納期(営業日) |
円形プラミドの準備 | 遺伝子合成 | 遺伝子合成(サードパーティ) | 7から10 |
プラミド増幅 | プラミド増幅 | 2 | |
プラミド抽出 | |||
線状プラミド準備 | プラミドの線形化と精製 | プラミド線状化 | 1 |
線状DNAの精製 | |||
プラズミドDNAの品質管理 | 濃度純度 | 紫外線(UV)分光光度計 | 1-2 |
プラミド構造 | アガロースゲル電気泳動 (AGE) | ||
キャピラリ電気泳動 (CE)-オプション | |||
プラミドの同定 | 制限酵素の識別/AGE |
線形化方法の柔軟な選択
DNA抽出および純化方法の最適化により、高い回収率を実現します。
厳格なプロセス管理基準で、研究用のプラミドサンプルの超螺旋構造率は80%以上です。
高水準かつ高効率のプラミド準備および品質管理サービスで、実験のニーズに応えます。
ヤオハイ・バイオファーマのカタログmRNA_luciferase製品を例にとると、転写テンプレートのプラミドサンプル(研究用)は超螺旋比率が90%以上、線形化比率はほぼ100%に近く、その後の転写比率は1:200(線状化されたプラミドDNA:mRNA)に達します。
線形化プラスミドをテンプレートとして準備したmRNA_luciferaseは、293T細胞に転染され、転染後24時間で酵素-基質反応活性が評価されます。
明显的強いルシフェラーゼ活性信号が検出でき、つまりルシフェラーゼタンパク質が効率的に発現しており、転写テンプレートの純度が高品質なmRNA準備の要件を完全に満たしていることを示しています。
スーパーコイル状プラスミド比率アッセイ
ルシフェラーゼmRNAの体外発現の検証