インビトロ転写 (IVT) mRNA の調製プロセスでは、T7 RNA ポリメラーゼの助けを借りて、IVT の転写テンプレートとして線状化プラスミド DNA が必要です。高品質のプラスミド DNA は、インビトロ転写にとって非常に重要です。
Yaohai Bio-Pharma は、成熟したプラスミド調製サービス プラットフォームに基づいて、高純度かつ高水準の線形化プラスミド DNA 調製サービスを提供し、効率的な IVT 転写を実現します。
プロセス | オプションサービス | サービスの詳細 | 配達期間(平日) |
環状プラスミドの調製 | 遺伝子合成 | 遺伝子合成(サードパーティ) | 7-10 |
プラスミド増幅 | プラスミド増幅 | 2 | |
プラスミド抽出 | |||
線状化プラスミド調製 | プラスミドの線状化と精製 | プラスミドの線状化 | 1 |
線形化DNA精製 | |||
プラスミドDNAの品質管理 | 濃度純度 | 紫外線(UV)分光光度計 | 1-2 |
プラスミドの立体構造 | アガロースゲル電気泳動(AGE) | ||
キャピラリー電気泳動(CE) - オプション | |||
プラスミドの識別 | 制限酵素の同定/AGE |
線形化方法の柔軟な選択
高い回収率を達成するための DNA 抽出および精製方法の最適化。
厳格なプロセス管理基準、研究用プラスミドサンプルのスーパーヘリカル構造形成率は 80% 以上。
実験ニーズを満たす高水準かつ高効率のプラスミド調製および品質管理サービス。
Yaohai Bio-Pharma カタログの mRNA_luciferase 製品を例にとると、転写テンプレートプラスミドサンプル (研究グレード) は、スーパーヘリカル比が 90% 以上、線形化比が 100% 近く、その後の転写比が最大 1:200 (線形化プラスミド DNA:mRNA) です。
直線化プラスミドをテンプレートとして調製して得られたmRNA_luciferaseを293T細胞に導入し、導入後24時間で酵素基質反応活性を評価します。
明らかに強いルシフェラーゼ活性シグナルが検出され、つまりルシフェラーゼタンパク質が効率的に発現され、転写テンプレートの純度が高品質の mRNA 調製の要件を完全に満たすことができることを示唆しています。
スーパーコイルプラスミド比アッセイ
ルシフェラーゼmRNA発現のin vitro検証