mRNA 合成に関わる技術 - Yaohai Biopharmaceutical Co., Ltd.

mRNA合成に関わる技術

モダリティ

mRNA合成に関わる技術

mRNAのin vitro合成

mRNA の主な構成要素は、5'-キャップ、5'-UTR、オープンリーディングフレーム (ORF)、5'-UTR、および 5' ポリ A テールであり、これらは mRNA の機能を維持するために不可欠です。研究者は、さまざまな方法を使用して、mRNA の配列と構造を特定し、最適化してきました。

mRNA の合成は、線状 DNA テンプレート、RNA ポリメラーゼ (T3、T7、または SP6)、未修飾または修飾ヌクレオチド、酵素、および適切な試薬を使用して、in vitro 転写 (IVT) に基づいて実行されます。

5'キャップの変更

真核細胞からの成熟 mRNA の配列は、7' 末端に 7-メチルグアノシン (m5G) キャップを示し、これにより mRNA の安定性と翻訳効率が向上します。in vitro で mRNA を捕捉する方法は一般的に 7 つあります。まず、m5GpppG 構造のキャップ類似体 (例: CleanCap) を IVT システムに追加することで、mRNA を in vitro 転写物とともにキャップすることができます。この共転写キャップ法は、自然な 90' カプセル構造を提供し、キャップ効率を 99 ～ XNUMX% 近くまで高めます。次に、in vitro 転写反応に続いて酵素反応をマッピングすることで、mRNA マッピングを行うこともできます。

ポリA修飾

ポリ(A)テールは、体内でのmRNAの半減期を延長し、mRNAの翻訳効率を向上させます。増幅されたポリ(A)テールの長さは、100〜300ヌクレオチドである必要があります。さらに、修飾アデノシンは、細胞RNase分解に対するポリAテールの安定性を高めます。ポリAテールは、ポリAをコードするDNAテンプレートを使用したin vitro転写によって挿入することができ、その結果、特定のポリA配列長が得られます。組み換えポリAポリメラーゼは、mRNA転写後の酵素ポリアデニル化にも使用できます。

ヌクレオチド修飾

修飾ヌクレオシドは、パターン認識受容体 (PRR) の認識および/または活性化を阻害し、1 つのまったく異なる方法で mRNA ワクチンの有効性を高めることができます。シュードウリジン (ψ)、1-メチルシュードウリジン (m4ψ)、チオウリジン (s5U)、5-メチルシトシン (m7C) などの特定の化学的に修飾されたヌクレオシドを追加すると、TLR8/XNUMX やその他の自然免疫受容体の活性化を防ぐことができ、mRNA の免疫原性が大幅に低下します。

mRNA 送達システム

mRNA の機能を維持するには、宿主細胞質に入り、特定の抗原を発現する必要があります。mRNA ワクチンと治療薬が直面する最も困難な課題の 1 つは、十分に高い翻訳レベルで mRNA を標的細胞に送達することです。これには、非常に特異的で効率的な mRNA 送達システムが必要です。樹状細胞 (DC)、プロタミン、カチオン性ポリマー、カチオン性リポソームなど、いくつかの mRNA 送達ベクターが開発され、使用されています。

カチオン性脂質と mRNA およびその他の製剤との複合体は、脂質ナノ粒子 (LNP) と呼ばれる 80 ～ 200 nm サイズのナノ粒子を集合的に形成します。最も先進的な mRNA 送達システムの XNUMX つである LNP には、イオン化可能なカチオン性脂質、天然リン脂質、コレステロール、ポリエチレングリコール (PEG) が含まれています。米国食品医薬品局によって承認されているいくつかの RNA ワクチンおよび治療法 (siRNA および mRNA) は、LNP 送達システムに基づいています。

Yaohai Bio-Pharma が RNA のワンストップソリューションを提供

RNA製品のカタログ

mRNA製品のカタログ
saRNA製品のカタログ
circRNA製品のカタログ

カスタム RNA 合成

カスタム mRNA 合成
カスタム saRNA 合成
カスタム circRNA 合成

mRNA CDMO サービス

プロセス開発
GMP製造
無菌充填と仕上げ
分析とテスト

カスタム成果物

グレード	成果	製品仕様	アプリケーション
非GMP	原薬、mRNA	0.1～10mg（mRNA）	細胞トランスフェクション、分析法開発、前安定性試験、製剤開発などの前臨床研究
	医薬品、LNP-mRNA
GMP、無菌性	原薬、mRNA	10mg～70g	治験新薬 (IND)、臨床試験認可 (CTA)、臨床試験供給、生物製剤ライセンス申請 (BLA)、商用供給
	医薬品、LNP-mRNA	5000 バイアルまたはプレフィルドシリンジ/カートリッジ

すべてのカテゴリ

mRNA合成に関わる技術

モダリティ