เอนไซม์สำหรับการผลิต ADC
คอนจูเกตแอนติบอดี-ยา (ADC) โดยทั่วไปประกอบด้วยโมโนโคลนอลแอนติบอดี (mAb) ที่เชื่อมโยงโควาเลนต์กับยาที่เป็นพิษต่อเซลล์ผ่านทางตัวเชื่อมโยงทางเคมี ADC ถูกสร้างขึ้นเพื่อลดช่องว่างระหว่าง mAb และยาที่เป็นพิษต่อเซลล์ เพื่อปรับปรุงความสามารถในการกำหนดเป้าหมายเฉพาะและผลการฆ่า ADC ไม่น้อยกว่าสิบห้ารายการได้รับการอนุมัติหรืออยู่ภายใต้การตรวจสอบด้านกฎระเบียบในประเทศต่างๆ ทั่วโลก
คุณลักษณะด้านคุณภาพที่สำคัญ (อัตราส่วนแอนติบอดีของยา) ของ ADC ได้รับผลกระทบจากวิธีการควบคู่ รวมถึงการควบคู่แบบสุ่มและการควบคู่เฉพาะตำแหน่ง การผันเฉพาะไซต์สามารถช่วยลดความหลากหลายของ ADC ได้
การผันไกลแคนที่ใช้เอนไซม์เป็นสื่อกลาง การเปลี่ยนแปลงไกลแคน และไกลโควิศวกรรมที่ตำแหน่ง N297 ของชิ้นส่วน IgG Fc สามารถสร้าง ADC เฉพาะไซต์ได้ เอนไซม์ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการผลิต ADC ได้แก่ Peptide-N-glycosidase (PNGase F), แบคทีเรียทรานส์กลูตามิเนส (BTG), Sortase A (SrtA), β1,4-galactosidase, β1,4-galactosyltransferase (Gal T), α2,6- เซียลิลทรานสเฟอเรส (Sial T), Endo-N-acetylglucosaminidase (ENGase), Endoglycosidase S (EndoS) และ Glycosyltransferases (GTs)
การใช้งาน
|
เอ็นไซม์
|
ฟังก์ชัน
|
การผันไกลแคนที่ใช้เอนไซม์เป็นสื่อกลาง
|
เปปไทด์-N-ไกลโคซิเดส (PNGase F)
|
แยกพันธะเอไมด์ระหว่างแซ็กคาไรด์ GlcNAc แรกและโซ่ข้าง L ของ Asn297 ปล่อยไกลแคนออกจากแอนติบอดี IgG
|
แบคทีเรียทรานส์กลูตามิเนส (BTG)
|
ผสานเพย์โหลดเฉพาะไซต์เพื่อสร้าง ADC
|
เรียงลำดับ A (SrtA)
|
กระตุ้นการผูกมัดของโปรตีน
|
β1,4-กาแลคโตซิเดส
|
ปล่อยกาแลคโตสส่วนปลายทั้งหมดและสร้างไอโซฟอร์ม G0 ที่เป็นเนื้อเดียวกันของแอนติบอดี
|
β1,4-กาแลคโตซิลทรานสเฟอเรส (Gal-T)
|
ถ่ายโอนน้ำตาลที่ตกค้างด้วยหมู่ฟังก์ชันที่เกิดปฏิกิริยาทางเคมี
|
α2,6-เซียลิลทรานสเฟอเรส (Sial T)
|
รวมกรดเซียลิกส่วนปลายไว้ในโครงสร้างไกลแคนดั้งเดิมของแอนติบอดี
|
การเปลี่ยนแปลงไกลแคนที่ใช้เอนไซม์เป็นสื่อกลางและไกลโคเอ็นจิเนียริ่ง
|
เอ็นโด-เอ็น-อะซิติลกลูโคซามินิเดส (ENGase)
|
ไฮโดรไลซ์พันธะ β1,4-glycosidic ระหว่าง GlcNAcβ1–4GlcNAc ของ N-glycans; กำจัดไกลแคนที่เชื่อมโยงกับ N บนบริเวณ Fc ของแอนติบอดี IgG
|
เอนโดไกลโคซิเดส เอส (EndoS)
|
ไกลโคซิลทรานสเฟอเรส (GTs)
|
ถ่ายโอน N-glycan oxazoline ไปยัง IgG ที่ถูก defucosylated
|
Yaohai Bio-Pharma นำเสนอโซลูชัน CDMO แบบครบวงจรสำหรับเอนไซม์