ความสำคัญของการพัฒนากระบวนการต้นน้ำ
กระบวนการต้นน้ำ (USP) หรือที่เรียกว่ากระบวนการหมัก เป็นหนึ่งในขั้นตอนเริ่มต้นของกระบวนการทางชีวภาพต้นน้ำ กระบวนการหมักจุลินทรีย์มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่มีความหนาแน่นสูงและการแสดงออกของยีนภายนอก ซึ่งส่งผลโดยตรงต่อผลผลิตและต้นทุนทางชีววิทยา
ในระยะแรกของการพัฒนาชีววิทยา (พรีคลินิกหรือระยะที่ 1/2) จุดมุ่งเน้นคือการพัฒนากระบวนการปลอดสัตว์ที่สามารถปรับขนาดได้โดยมีผลผลิตปานกลาง และเป็นไปตามมาตรฐานคุณภาพผลิตภัณฑ์ทั้งหมด
ในขณะที่ยังอยู่ในช่วงท้าย (ระยะที่ 3 หรือเชิงพาณิชย์) เราจะมุ่งเน้นไปที่ผลผลิต ความทนทาน ความสามารถในการขยายขนาด และความสามารถในการทำซ้ำ เพื่อสร้างกระบวนการที่คุ้มต้นทุน กิจกรรมที่แก้ไขปัญหาเหล่านี้คือการศึกษาลักษณะเฉพาะของกระบวนการและการตรวจสอบความถูกต้องของกระบวนการ ในขณะเดียวกัน โดยทั่วไปจะใช้เครื่องมือคุณภาพตามการออกแบบ (QbD) และการออกแบบการทดลอง (DoE)
คำสำคัญ: การพัฒนากระบวนการ การเพิ่มประสิทธิภาพและการตรวจสอบความถูกต้อง กระบวนการหมัก การหมักเซลล์จุลินทรีย์ การหมักแบคทีเรีย การหมักยีสต์ การหมักแบบความหนาแน่นสูง การหมักสายพันธุ์เชิงวิศวกรรม
ใบสมัคร: อุตสาหกรรมชีวเภสัชภัณฑ์, ยาสำหรับมนุษย์, ยาสัตว์, วัคซีน, ชีววิทยาโมเลกุลขนาดใหญ่รีคอมบิแนนท์, ชีววิทยารีคอมบิแนนท์, รีเอเจนต์ทางชีวภาพ
โซลูชั่น USP ของ Yaohai Bio-Pharma
Yaohai Bio-Pharma ได้รับประโยชน์จากประสบการณ์การหมักจุลินทรีย์มากว่า 10 ปี และมีความเชี่ยวชาญในการช่วยแก้ปัญหาความท้าทายในกระบวนการหมัก เราสามารถสร้างกลยุทธ์การหมักที่มีความหนาแน่นสูงได้อย่างรวดเร็ว Escherichia coli (อีโคไล) การหลั่งของ periplasmic การแสดงออกของร่างกายที่ละลายได้หรือรวมอยู่ในเซลล์ และการแสดงออกของยีสต์ภายนอกเซลล์หรือในเซลล์
บริการพัฒนากระบวนการหมักทั่วไปของเราประกอบด้วย:
- การออกแบบกระบวนการหมักดำเนินการที่ระดับ 7 ลิตรขนาดเล็กในโหมดฟีดแบทช์
- การตรวจสอบความถูกต้องของกระบวนการแบบสามชุดในถังหมักขนาด 7 ลิตร
- กระบวนการขั้นกลางขยายขนาดได้ถึง 30 ลิตร/70 ลิตร
เราดำเนินการเพิ่มประสิทธิภาพหลายพารามิเตอร์ได้อย่างยืดหยุ่นเพื่อให้ได้ผลตอบแทนหรือสัดส่วนที่ต้องการ โดยใช้ One-Time-A-Factor (OTAF) หรือ Design-of-experiments (DoE)
พารามิเตอร์การหมักที่สำคัญมีดังต่อไปนี้:
องค์ประกอบของสื่อการหมักที่ปราศจากสัตว์
ปราศจากยาปฏิชีวนะหรือไม่ ปริมาณหัวเชื้อ
อุณหภูมิการเติบโต, pH, ระดับออกซิเจนละลายน้ำ (DO)
โหมดการให้อาหาร (เช่น fed-batch)
ความเข้มข้นของตัวเหนี่ยวนำ (เช่น IPTG, เมทานอล), จุดเหนี่ยวนำ (น้ำหนักเปียกของเซลล์/OD600)
อุณหภูมิการเหนี่ยวนำ เวลาการเหนี่ยวนำ
เป็นต้น
รายละเอียดบริการ
| บริการ |
กระบวนการไหล |
| การเพาะปลูกในขวดเชค(500 มล.) |
การเตรียมอาหารปลอดสัตว์ → การเพาะเมล็ดจุลินทรีย์ → การเพาะในเชคเกอร์ → การชักนำ → การเก็บเกี่ยว |
| การเพาะปลูกในถังหมัก (7 ลิตร) |
การเตรียมอาหารปลอดสัตว์ → การเพาะเมล็ดจุลินทรีย์ → การหมักเซลล์ความหนาแน่นสูงในถังปฏิกรณ์ชีวภาพขนาด 7 ลิตร → การชักนำ → การเก็บเกี่ยว |
| การควบคุมคุณภาพของโปรตีน/เปปไทด์ |
การปรับสภาพ การแสดงออกที่ละลายได้ในเซลล์: การเก็บเกี่ยวเซลล์จุลินทรีย์และการแขวนลอยใหม่ → การบดด้วยคลื่นเสียงความถี่สูง → การกำจัดเศษเซลล์ → สารสกัดหยาบ การแสดงออกของร่างกายที่รวมอยู่: การเก็บเกี่ยวและการแขวนลอยของเซลล์จุลินทรีย์ → การบดด้วยคลื่นเสียงความถี่สูง → การเตรียมร่างกายที่รวมอยู่ → สารสกัดหยาบ การแสดงออกที่ละลายได้นอกเซลล์: การรวบรวมส่วนเหนือตะกอนจากการเพาะเลี้ยง → ความเข้มข้นและบัฟเฟอร์ แลกเปลี่ยน → สารสกัดดิบ การวิเคราะห์คุณภาพ สารสกัดดิบเป็นตัวอย่าง → การวิเคราะห์โปรตีนเป้าหมายโดย SDS PAGE หรือ Western blotting (WB) |
| การควบคุมคุณภาพของพลาสมิด |
การบำบัดเบื้องต้นและการวิเคราะห์คุณภาพ การสกัดพลาสมิด → การวิเคราะห์ DNA โดยอะกาโรสเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส |
กรณีศึกษา
ลูกค้าของเรามอบหมายให้เพิ่มผลผลิตฮอร์โมนโพลีเปปไทด์เป้าหมายจาก 8 กรัม/ลิตร เป็น 10 กรัม/ลิตร
จากการออกแบบแฟคทอเรียลแบบเต็มและการออกแบบพื้นผิวการตอบสนองในเครื่องมือ DoE เราจดจำและปรับพารามิเตอร์การหมักที่สำคัญได้อย่างรวดเร็ว ภายใต้กระบวนการหมักที่มีความหนาแน่นของเซลล์สูงที่ได้รับการปรับปรุง ระดับการแสดงออกเพิ่มขึ้นเป็น 10 กรัม/ลิตร
ประสบการณ์ของเรา
- เราได้ศึกษาโฮสต์ของจุลินทรีย์หลายประเภท เช่น E.coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia Pastoris (P. Pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink สายพันธุ์ 1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) และ Hansenula polymorpha (H. polymorpha).
- เรามีประสบการณ์กับ E. coli การหลั่งของ periplasmic การแสดงออกของร่างกายที่ละลายได้และการรวมตลอดจนการแสดงออกของยีสต์ในเซลล์หรือนอกเซลล์ ผลผลิตของสารที่รวมอยู่สูงถึง 10 กรัม/ลิตร ในขณะที่ผลผลิตโปรตีนที่ละลายน้ำได้อยู่ในช่วงตั้งแต่ 0.5 ถึง 15 กรัม/ลิตร
- เรามีส่วนร่วมในการพัฒนาและการผลิตโมเลกุลขนาดใหญ่ต่างๆ รวมถึงวัคซีนหน่วยย่อยชนิดรีคอมบิแนนท์ อนุภาคคล้ายไวรัส (VLPs) ฮอร์โมน (อินซูลิน GLP-1 ฮอร์โมนการเจริญเติบโต) ไซโตไคน์ (Interleukin-2/IL-2, IL -15, IL-21), ปัจจัยการเจริญเติบโต (EGF, FGF, NGF), นาโนบอดี/แอนติบอดีแบบโดเมนเดียว (sdAbs), เอนไซม์ ฯลฯ
- อุปกรณ์ใช้สอย
ระบบหมัก 7L*16
เครื่องวิเคราะห์ Cedex Bio, เครื่องวิเคราะห์กระบวนการทางชีวภาพ
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
