mRNA ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการศึกษาการทำงานของยีนหรือโปรตีน ในขณะเดียวกันก็เป็นเรื่องปกติในการพัฒนาทางชีววิทยาเชิงป้องกันและรักษาโรค เนื่องจากเป็นกลยุทธ์การสังเคราะห์ทั่วไปสำหรับโมเลกุล RNA การถอดรหัสในหลอดทดลอง (IVT) จึงช่วยให้เราได้รับการถอดเสียงแบบกำหนดเองได้อย่างมีประสิทธิภาพ
Yaohai Bio-Pharma ได้สร้างชุดเทคโนโลยีการสังเคราะห์ mRNA เพื่อมอบ RNA คุณภาพสูง เช่น การออกแบบลำดับและการเพิ่มประสิทธิภาพ การทำ IVT การทำให้บริสุทธิ์ การทำไลโอฟิไลเซชัน และการห่อหุ้มอนุภาคนาโนไขมัน (LNP) ผลิตภัณฑ์ทั้งหมดได้รับการเผยแพร่ภายใต้มาตรฐานการควบคุมคุณภาพ (QC) ที่เข้มงวด
จากการแพร่ระบาดของโควิด-19 ในปี 2020 เทคโนโลยี mRNA ได้ก้าวหน้าอย่างก้าวกระโดด และการวิจัยและการใช้งานที่เกี่ยวข้องก็ได้รับการพัฒนาอย่างที่ไม่เคยมีมาก่อน ซึ่งรวมถึงวัคซีนป้องกันโรคสำหรับการป้องกันโรคติดเชื้อ วัคซีนและยารักษาโรคเนื้องอกวิทยา การบำบัดเนื้องอก โปรตีน การบำบัดทดแทน เวชศาสตร์ฟื้นฟู และการบำบัดด้วยเซลล์และยีน (CGT)
วัคซีน mRNA | การบำบัดด้วย mRNA |
|
กระบวนการ | บริการเสริม | รายละเอียดบริการ | ระยะเวลาจัดส่ง (วันทำการ) | ส่งมอบ |
การออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพลำดับ mRNA | การออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพลำดับการเข้ารหัส | การออกแบบลำดับ CDS และการเพิ่มประสิทธิภาพรหัส | 1-3 | ไฟล์ลำดับ |
การออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพของลำดับที่ไม่เข้ารหัส | การออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพของลำดับ UTR, polyA | |||
การเตรียมพลาสมิดของเทมเพลตการถอดความ | การเตรียมพลาสมิดชนิดรีคอมบิแนนท์ | การสังเคราะห์ยีน | 7-10 | |
การขยายและการสกัดพลาสมิด | 4 | |||
พลาสมิดเชิงเส้นและการทำให้บริสุทธิ์ | ||||
mRNA การถอดความในหลอดทดลอง | Co-transcriptional capping (วิธีขั้นตอนเดียว) | การถอดรหัสภายนอกร่างกาย (IVT) / แคปอะนาล็อก | 1-2 | N / A |
การดัดแปลงนิวคลีโอไทด์ (การดัดแปลง UTP/CTP) | ||||
การลบเทมเพลต DNA (DNase I) | ||||
การปิดฝาด้วยเอนไซม์ (กระบวนการสองขั้นตอน) | ไอวีที | 2-3 | ||
การดัดแปลงนิวคลีโอไทด์ (การดัดแปลง UTP/CTP) | ||||
การลบเทมเพลต DNA (DNase I) | ||||
การทำให้บริสุทธิ์ด้วย mRNA (ลิเธียมคลอไรด์/เม็ดแม่เหล็ก) | ||||
การปิดฝาด้วยเอนไซม์ | ||||
การทำให้บริสุทธิ์ mRNA | รูปแบบการทำให้บริสุทธิ์แบบธรรมดา | การตกตะกอนของลิเธียมคลอไรด์ | 1 | สารยา mRNA |
การทำให้บริสุทธิ์ด้วยลูกปัดแม่เหล็ก | ||||
รูปแบบการทำให้คอลัมน์บริสุทธิ์ด้วยโครมาโตกราฟี | การรวมกันของวิธีการโครมาโตกราฟีหลายวิธี | 1-2 | ||
การแลกเปลี่ยนบัฟเฟอร์ | อัลตราฟิลเตรชัน | 1 | ||
mRNA การไลโอฟิไลเซชัน | ไลโอฟิไลเซชั่น | ก่อนแช่แข็ง | 2-3 | ผงไลโอฟิไลซ์ mRNA |
การอบแห้งเบื้องต้น (การระเหิด) | ||||
การทำแห้งขั้นที่สอง (การคายการดูดซึม) | ||||
mRNAการห่อหุ้ม | การห่อหุ้ม LNP | การห่อหุ้ม LNP | 2-3 | ผลิตภัณฑ์ mRNA-LNPDrug |
ความเข้มข้นและการแลกเปลี่ยนบัฟเฟอร์ | ||||
การวิเคราะห์คุณภาพ mRNA | สารยา mRNA/ผงไลโอฟิไลซ์ | ความเข้มข้นความบริสุทธิ์ | 1 | รายงานผลการทดสอบ |
ความสมบูรณ์ ประสิทธิภาพการปิดฝา การกระจายส่วนท้ายของ polyA | 2-5 | |||
ผลิตภัณฑ์ยา mRNA-LNP | ประสิทธิภาพการห่อหุ้ม | 1 | ||
ขนาดอนุภาคและการกระจายตัว | ||||
การชาร์จพื้นผิว | ||||
การตรวจสอบความถูกต้องของนิพจน์ mRNA | การประเมินเซลล์ 293T | การชุบเซลล์ | 4 | |
การถ่ายเซลล์ชั่วคราว | ||||
การสังเกตสัญญาณเรืองแสง | 1-3 | |||
Western blot (WB)/ การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA) |
5' แคป |
▪ ไม่ได้แคป ▪ Cap0, ต่อยอดร่วม ▪ Cap1, ต่อยอดร่วม ▪ Cap1 การปิดฝาด้วยเอนไซม์ |
5'UTR/3'UTR |
▪ ลำดับ UTR ธรรมชาติ ▪ ลำดับ UTR กลายพันธุ์/วิศวกรรม |
หางโพลีเอ 3' |
▪ 100A ~120A หาง (แนะนำ) ▪ ส่วนท้ายโพลีเอแบบแบ่งส่วน ▪ ส่วนท้ายแบบกำหนดเองอื่น ๆ |
นิวคลีโอไซด์ที่ถูกดัดแปลง |
▪ ฐานที่ยังไม่ได้แก้ไข ▪ ซูดูริดีน (Ψ) ▪ N1-เมทิลซูดูริดีน (N1Ψ) ▪ 5-เมทิลไซโตซีน (m5C) ▪ 5-เมทิลลูริดีน (m5U) ▪ 5-เมทอกซียูริดีน (5moU) ▪ 2-ไทโอริดีน (s2U) ▪ 2′-O-เมทิล-U ▪ การแก้ไขอื่นๆ |
กระแสบริการแบบรวม
ให้บริการต่างๆ ตั้งแต่การออกแบบลำดับส่วนหน้า ไปจนถึงการเตรียม mRNA ของส่วนหลัง การควบคุมคุณภาพ และการตรวจสอบความถูกต้องของนิพจน์
การออกแบบลำดับและการเพิ่มประสิทธิภาพระดับสากล
การออกแบบลำดับ mRNA ระดับมืออาชีพและการเพิ่มประสิทธิภาพช่วยให้การแสดงออกของ mRNA มีประสิทธิภาพ
การปรับเปลี่ยนนิวคลีโอไทด์ที่หลากหลาย
เพิ่มการแสดงออกของ mRNA ได้อย่างมีประสิทธิภาพ และลดการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันที่ไม่พึงประสงค์ของ mRNA
แพลตฟอร์มการทำให้บริสุทธิ์สำหรับผู้ใหญ่
ด้วยการรวมวิธีการทำให้บริสุทธิ์แบบเดิมๆ และที่ออกแบบด้วยตนเอง ทำให้ได้ตัวอย่าง mRNA ที่มีความบริสุทธิ์สูง
แพลตฟอร์ม QC ที่สมบูรณ์
เพิ่มตัวเลือก QC เพื่อให้ตรงตามข้อกำหนดของการทดสอบตามปกติ เช่น ความเข้มข้น ความบริสุทธิ์ A260/280 และความสมบูรณ์ ตลอดจนข้อกำหนดการควบคุมคุณภาพสูง เช่น ประสิทธิภาพการกำหนดสูงสุด/การกระจาย polyA
จัดส่งที่รวดเร็ว
mRNA แบบกำหนดเองสามารถจัดส่งได้ภายในเวลา 7 วัน ยกเว้นการสังเคราะห์ลำดับจากภายนอก