หน้าแรก > IVT อาร์เอ็นเอ > การสังเคราะห์ RNA แบบกำหนดเอง > การสังเคราะห์ mRNA แบบกำหนดเอง > mRNA การถอดรหัสร่วมสูงสุดที่กำหนด
เมื่อเปรียบเทียบกับการปิดฝาด้วยเอนไซม์สองขั้นตอน วิธีการปิดฝาด้วยการถอดรหัสร่วมในขั้นตอนเดียวสามารถลดการไหลของกระบวนการได้อย่างมาก วิธีการนี้มุ่งเน้นไปที่ผลลัพธ์และเกี่ยวข้องกับการเติมแคปอะนาล็อกเข้ากับปฏิกิริยาการถอดรหัสภายนอกร่างกาย (IVT) สามารถใส่แคปแอนะล็อกได้เมื่อเริ่มการถอดรหัส และสามารถรับ mRNA ที่มีโครงสร้างแคปได้เมื่อเสร็จสิ้นการถอดรหัส แคปแอนะล็อกรุ่นที่สามในปัจจุบันสามารถหลีกเลี่ยงการกลับแคปและเพิ่มโครงสร้าง Cap 1 ให้กับผลิตภัณฑ์การถอดเสียงได้โดยตรง
สำหรับการพิจารณา mRNA ในร่างกาย การสร้างภูมิคุ้มกันและประสิทธิภาพการแปล กระบวนการ IVT มักจะใช้ NTP ที่ถูกดัดแปลงบางชนิด และนิวคลีโอไทด์ที่ถูกดัดแปลงทั่วไปคือ pseudouridine (Ψ), N1-methyl-pseudouri-dine (N1Ψ) และ 5-methylcytosine (5mC) .
รูป: แผนภาพของ mRNA Co-transcriptional และ Capping Reaction
บริการ |
รายละเอียดบริการ |
ระยะเวลาจัดส่ง (วันทำงาน) |
การจำกัดการถอดเสียงร่วม |
การตอบสนองจากการถอดเสียง ในหลอดทดลอง (อะนาล็อก Clean Cap) | 1-2 |
| การดัดแปลงนิวคลีโอไทด์ (Ψ/N1Ψ/5mC) | ||
| การลบเทมเพลต DNA (DNase I) | ||
การเพิ่มประสิทธิภาพเงื่อนไข IVT - ทางเลือก |
การออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพส่วนประกอบของปฏิกิริยา | 3-7 |
กลยุทธ์การปรับเปลี่ยนนิวคลีโอไทด์ที่เป็นทางเลือกหลายอย่างสามารถปรับปรุงการแสดงออกของโปรตีนได้
บรรลุอัตราส่วนการถอดรหัสสูงและประสิทธิภาพการกำหนดสูงสุด
บรรลุอัตราสูงสุดที่กำหนดมากกว่า 95%
ป้องกันการย่อยสลาย mRNA ได้อย่างมีประสิทธิภาพโดยการควบคุม RNase อย่างเข้มงวดในสภาพแวดล้อมการทดลองและวัสดุสิ้นเปลือง
Yaohai Bio-Pharma ได้สร้างแพลตฟอร์มกระบวนการปิดฝาแบบถอดรหัสร่วมที่สมบูรณ์ โดยใช้อะนาลอกฝาสะอาดเพื่อเพิ่มโครงสร้าง Cap1 โดยตรง ในขณะที่หลีกเลี่ยงการปิดฝาย้อนกลับ หลังจากการบำบัดตัวอย่างที่ได้มาตรฐานและการตรวจจับด้วยอิเล็กโทรโฟรีซิส (CE) ของเส้นเลือดฝอย อัตราการกำหนดของ mRNA ของโปรตีนเรืองแสงสีเขียว (eGFP) ที่ได้รับการปรับปรุงสามารถเข้าถึงได้มากกว่า 95%
ประสิทธิภาพการจำกัด eGFP mRNA มากกว่า 95%
eGFP mRNA และ mCherry mRNA ที่เตรียมโดย co-transcriptional capping จะถูกแปลงร่างเป็นเซลล์ 293T ตามลำดับ และสังเกตสัญญาณฟลูออเรสเซนต์ที่เข้มข้นหลังจาก 48 ชั่วโมง ซึ่งบ่งบอกว่า mRNA ถูกแสดงออกอย่างมีประสิทธิภาพในเซลล์ 293T
การแสดงออกของ eGFP mRNA และ mCherry mRNA ในเซลล์ 293T
Yaohai Bio-Pharma ให้ความสำคัญกับโซลูชั่น CRDMO ของจุลินทรีย์มานานกว่า 14 ปี เราให้บริการด้านชีววิทยาแบบครบวงจรแก่ลูกค้าทั่วโลก
No. 801, Jiankang Avenue, Taizhou, Jiangsu, China
ลิขสิทธิ์© Yaohai Biopharmaceutical Co., Ltd. สงวนลิขสิทธิ์ | นโยบายความเป็นส่วนตัว
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN