หมวดหมู่ทั้งหมด
การถอดรหัสในหลอดทดลอง (IVT)

IVT RNA

IVT, การถอดแบบในหลอดทดลอง

เกี่ยวกับการผลิตมวลชนม RNA การถอดรหัสในหลอดทดลอง (IVT) เป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพและสุกงอมากกว่า การทำปฏิกิริยา IVT จะใช้ DNA พลาสมิดที่ตัดเส้นตรงแล้วซึ่งมีโปรตีน T7 เป็นแม่แบบ และ mRNA จะถูกสังเคราะห์โดยใช้ไนโตรไซด์ไตรฟอสเฟต (NTPs) เป็นสารตั้งต้นในความเข้มข้นของโพลิเมอเรส T7 RNA

การแก้ไขโครงสร้างนิวคลีโอไทด์เป็นความก้าวหน้าสำคัญในการศึกษา mRNA โดย mRNA ที่ไม่มีการแก้ไขจะถูกตรวจจับโดยเซนเซอร์ RNA ภายในเซลล์เพื่อกระตุ้นระบบภูมิคุ้มกันตามธรรมชาติ ด้วยเหตุนี้ เมื่อพิจารณาถึงความเป็นภูมิคุ้มกันในร่างกายและการแปลรหายีนของ mRNA กระบวนการ IVT มักจะใช้ NTPs ที่มีการแก้ไขบางประเภท โดยนิวคลีโอไทด์ที่แก้ไขทั่วไปได้แก่ พิวโดยูริดีน (Ψ), N1-เมทิล-พิวโดยูริดีน (N1Ψ) และ 5-เมทิลไซโตซีน (5mC)

undefined

กระบวนการการถอดแบบในหลอดทดลองของ mRNA

图片

แผนภาพปฏิกิริยาการถอดแบบในหลอดทดลอง (IVT)

รายละเอียดบริการ
บริการเพิ่มเติม
รายละเอียดบริการ
ระยะเวลาส่งมอบ (วันทำงาน)
การทรานสคริปต์ในหลอดทดลอง (IVT)
IVT, การถอดแบบในหลอดทดลอง 1
การแก้ไขนิวคลีโอไทด์ (Ψ/N1Ψ/5mC ฯลฯ)
การกำจัดเทมเพลต DNA (DNase I)
การปรับแต่งเงื่อนไข IVT - ตัวเลือก
การออกแบบและปรับแต่งองค์ประกอบปฏิกิริยา IVT 2-5
คุณลักษณะของเรา
  • กลยุทธ์การดัดแปลงนิวคลีโอไทด์ที่หลากหลาย

ปรับปรุงความเสถียรของ mRNA และการแสดงออกของโปรตีนในสภาวะใน vivo ได้。

  • การออกแบบและการปรับแต่งการทดสอบอย่างเข้มงวด

สามารถเตรียมชิ้นส่วน mRNA ได้ยาวถึง 10kb。

  • การทรานสคริปชันที่มีประสิทธิภาพ

โดยการปรับแต่งเงื่อนไขปฏิกิริยา IVT อัตราการทรานสคริปชันจะสูงถึง 1:200

  • ควบคุม RNase อย่างเข้มงวด

ควบคุม RNase อย่างเข้มงวดผ่านสภาพแวดล้อมการทดลองและอุปกรณ์ที่ใช้สามารถป้องกันการเสื่อมของ mRNA ได้อย่างมีประสิทธิภาพ

กรณีศึกษา

ระบบปฏิกิริยา IVT ในปัจจุบันได้รับการปรับแต่งให้เหมาะสมสำหรับระบบสังเคราะห์ที่มีความยาวประมาณ 100 nt ไม่ใช่สำหรับ mRNA ที่มีความยาวใดๆ ก็ตาม ยิ่งลำดับ mRNA มีความยาวมากเท่าไร การทรานสคริปชันก็จะยิ่งยากขึ้นและมีแนวโน้มที่จะเสื่อมลงมากขึ้น

เพื่อเตรียมลำดับ mRNA ที่ปรับแต่งได้ตามต้องการ โดยมีความยาวประมาณ 10 กิโลเบส ยาโอไฮ ไบโอ-ฟาร์มา ได้ประสบความสำเร็จในการเตรียมตัวอย่างคุณภาพสูงด้วยอัตราการถอดแบบสูง 1:135 และได้รับผลิตภัณฑ์ mRNA ที่ผ่านการกรองขั้นต้น 135 ไมโครกรัม หลังจากการถอดแบบใน vitro จากพลาสมิดเชิงเส้น 1 ไมโครกรัม ผ่านการออกแบบทดลองอย่างเข้มงวด การปรับปรุงเงื่อนไขปฏิกิริยาอย่างต่อเนื่อง และการควบคุม RNase อย่างเคร่งครัด

图片

ระบุ mRNA (การแยกด้วยเจลอะคารอส)

ขอใบเสนอราคาฟรี

Get in touch