หน้าแรก > IVT อาร์เอ็นเอ > การสังเคราะห์ RNA แบบกำหนดเอง > การสังเคราะห์ mRNA แบบกำหนดเอง > การถอดความ ในหลอดทดลอง, IVT
เกี่ยวกับการผลิต mRNA จำนวนมาก การถอดรหัสในหลอดทดลอง (IVT) เป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพและสุกงอมมากกว่า ปฏิกิริยา IVT ใช้พลาสมิด DNA เชิงเส้นซึ่งมีโปรโมเตอร์ T7 เป็นเทมเพลต และ mRNA ถูกสังเคราะห์ด้วยนิวคลีโอไซด์ ไตรฟอสเฟต (NTP) เป็นซับสเตรตเมื่อมี T7 RNA polymerase
การดัดแปลงนิวคลีโอไทด์เป็นความก้าวหน้าในการสำรวจ mRNA โดยที่เซ็นเซอร์ RNA ในเซลล์จะรับรู้โมเลกุล mRNA ที่ยังไม่ได้ดัดแปลง เพื่อกระตุ้นภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติ สำหรับการพิจารณาของ mRNA ในร่างกาย การสร้างภูมิคุ้มกันและประสิทธิภาพการแปล กระบวนการ IVT มักจะใช้ NTP ดัดแปลงบางชนิด และนิวคลีโอไทด์ดัดแปลงทั่วไปคือซูโดริดีน (Ψ), N1-เมทิล-ซูดูริดีน (N1Ψ) และ 5-เมทิลไซโตซีน (5mC)
แผนภาพปฏิกิริยาการถอดรหัสภายนอกร่างกาย (IVT)
บริการเสริม |
รายละเอียดบริการ |
ระยะเวลาจัดส่ง (วันทำงาน) |
การถอดรหัส ในหลอดทดลอง (IVT) |
IVT การถอดความ ในหลอดทดลอง | 1 |
| การดัดแปลงนิวคลีโอไทด์ (Ψ/N1Ψ/5mC ฯลฯ) | ||
| การลบเทมเพลต DNA (DNase I) | ||
การเพิ่มประสิทธิภาพเงื่อนไข IVT - ทางเลือก |
การออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพส่วนประกอบปฏิกิริยา IVT | 2-5 |
ปรับปรุงความเสถียรของ mRNA และการแสดงออกของโปรตีน ในร่างกาย
สามารถจัดเตรียมแฟรกเมนต์ mRNA ได้ถึง 10kb
ด้วยการปรับสภาวะปฏิกิริยา IVT ให้เหมาะสม อัตราการถอดรหัสจะสูงถึง 1:200
การควบคุม RNase อย่างเข้มงวดผ่านสภาพแวดล้อมการทดลองและวัสดุสิ้นเปลืองสามารถป้องกันการย่อยสลาย mRNA ได้อย่างมีประสิทธิภาพ
ระบบปฏิกิริยา IVT ในปัจจุบันได้รับการปรับให้เหมาะสมโดยประมาณสำหรับระบบสังเคราะห์ที่มีความยาวประมาณ 100 nt ไม่ใช่สำหรับ mRNA ที่มีความยาวตามใจชอบ ยิ่งลำดับ mRNA ยาวเท่าใด การถอดเสียงก็จะยิ่งยากขึ้นเท่านั้น และมีแนวโน้มที่จะสลายตัวมากขึ้นด้วย
เพื่อเตรียมลำดับ mRNA แบบกำหนดเองที่มีความยาวประมาณ 10 kb นั้น Yaohai Bio-Pharma ประสบความสำเร็จในการเตรียมตัวอย่างคุณภาพสูงด้วยอัตราส่วนการถอดรหัสสูงที่ 1:135 และได้รับผลิตภัณฑ์ mRNA บริสุทธิ์เริ่มแรก 135 ไมโครกรัม หลังจากพลาสมิดเชิงเส้น 1 ไมโครกรัม ได้รับการถ่ายทอดในหลอดทดลองผ่านการออกแบบการทดลองที่เข้มงวด การปรับสภาวะปฏิกิริยาให้เหมาะสมอย่างต่อเนื่อง และการควบคุม RNase ที่เข้มงวด
mRNA ระบุ (Agarose Gel Electrophoresis)
Yaohai Bio-Pharma ให้ความสำคัญกับโซลูชั่น CRDMO ของจุลินทรีย์มานานกว่า 14 ปี เราให้บริการด้านชีววิทยาแบบครบวงจรแก่ลูกค้าทั่วโลก
No. 801, Jiankang Avenue, Taizhou, Jiangsu, China
ลิขสิทธิ์© Yaohai Biopharmaceutical Co., Ltd. สงวนลิขสิทธิ์ | นโยบายความเป็นส่วนตัว
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN