ความสำคัญของการคัดเลือกเชื้อสาย
การคัดเลือกโฮสต์ที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการพัฒนา CMC ของชีวภัณฑ์ ซึ่งจะกำหนดคุณภาพและความสม่ำเสมอของผลิตภัณฑ์และกระบวนการผลิต เป้าหมายโดยตรงของการคัดเลือกโฮสต์คือการให้ธนาคารเซลล์ต้นแบบ (PCB) ที่มีระดับการแสดงออกสูงและความเสถียรสูงในแง่ของเสถียรภาพในการผ่านพันธุ์และการเก็บรักษา การคัดเลือกโฮสต์ที่เหมาะสมมีความจำเป็นด้วยเหตุผลหลักสองประการ:
- ก่อนอื่น เพื่อเลือกโฮสต์จุลชีพที่มีระดับการแสดงออกสูง มีสายพันธุ์เชิงพาณิชย์หลายชนิดที่ใช้เพื่อแสดงโปรตีนประเภทต่าง ๆ เช่น โปรตีนพิษ โปรตีนละลายได้ หรือโปรตีนยูคาริโอต
- ประการที่สอง เพื่อคัดเลือกโฮสต์ที่มีเสถียรภาพทางพันธุกรรม การทดสอบเสถียรภาพทางพันธุกรรมเป็นจุดสำคัญตลอดวงจรชีวิตของการผลิต ควรยอมรับว่าเสถียรภาพทางพันธุกรรมสูงเป็นอีกหนึ่งลักษณะสำคัญของสายพันธุ์ที่เหมาะสม
คำสำคัญ: การคัดเลือกเชื้อจุลินทรีย์, การกรองเชื้อจุลินทรีย์, การตรวจจับแบคทีเรียหรือยีสต์แบบ high-throughput, การคัดเลือกเชื้อจุลินทรีย์ที่ผลิตสูง, การคัดเลือกเชื้อจุลินทรีย์ที่มั่นคง, การคัดเลือกเชื้อจุลินทรีย์ที่มั่นคงทางพันธุกรรม แอปพลิเคชัน: ยาสำหรับมนุษย์, ยาสำหรับสัตว์, วัคซีน, ชีวภาพสังเคราะห์, ชีวเวชภัณฑ์โมเลกุลใหญ่แบบรีคอมไบแนท, เรียวัตถุทางชีวภาพ
บริการคัดเลือกเชื้อจุลินทรีย์ของ Yaohai Bio-Pharma
ด้วยประสบการณ์ CDMO กว่า 10 ปีในด้านชีวภาพจุลินทรีย์ เราสนับสนุนการพัฒนาและการผลิตสารโมเลกุลใหญ่หลายประเภท เช่น วัคซีนย่อยแบบรีคอมไบแนท, อนุภาคคล้ายไวรัส (VLP), ฮอร์โมน (อินซูลิน, GLP-1, ฮอร์โมนการเจริญเติบโต), ไซโตไคน์ (อินเทอร์ลิวคิน-2/IL-2, IL-15, IL-21), แฟคเตอร์การเจริญเติบโต (EGF, FGF, NGF), นาโนบอดี้/แอนติบอดีโดเมนเดี่ยว (sdAbs), เอนไซม์ เป็นต้น
เรามีประสบการณ์มากมายในการคัดเลือกเวกเตอร์พลาสมิดชนิดต่างๆ และโฮสต์จุลินทรีย์ เช่น แบคทีเรีย Escherichia coli (E. coli), และยีสต์ Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). เราสามารถค้นหาระบบการแสดงออกที่ดีที่สุดสำหรับชีวภาพเฉพาะของคุณได้
เราได้รวบรวมโฮสต์จุลชีพหลากหลายชนิดที่มีแหล่งที่มาชัดเจนและ CoA มาตรฐาน รวมถึง อี.โคไล การแสดงออกและการแสดงออกของยีสต์
รายละเอียดบริการ
|
บริการ
|
รายละเอียดบริการ
|
ระยะเวลาขั้นต่ำ/วัน
|
สิ่งที่จะได้รับ
|
|
การสร้างเชื้อพันธุ์ (E. coli)
|
การแปลงพลาสมิด (หลายโฮสต์)
|
5
|
COA ของโฮสต์เชิงพาณิชย์ รายงานการสร้างเชื้อพันธุ์
|
|
การตรวจสอบด้วย PCR
|
|
การเพิ่มความบริสุทธิ์ของเชื้อ
|
|
การเก็บรักษาเชื้อ
|
|
การก่อสร้างเชื้อ (ยีสต์)
|
การเตรียมเซลล์ยีสต์ที่มีความสามารถ
|
10
|
|
การแปลงพลาสมิดให้เป็นเส้นตรง
|
|
การเปลี่ยนแปลงด้วยไฟฟ้า
|
|
การคัดกรองความต้านทาน/ภาวะขาดสารอาหาร
|
|
การเพิ่มความบริสุทธิ์ของเชื้อ
|
|
การเก็บรักษาเชื้อ
|
|
การคัดเลือกโฮสต์ที่เหมาะสม
|
การสกัดดีเอ็นเอจากพลาสมิดหรือจีโนม
|
15-20
|
กระบวนการคัดเลือกโฮสต์ COA ของเชื้อที่ถูกวิศวกรรม
|
|
การตรวจสอบด้วย PCR การย่อยเอนไซม์รีสทริกชัน
|
|
การลำดับจีโนมยีนเป้าหมาย
|
|
การคัดเลือกโฮสต์ที่แสดงออกสูง
|
|
การคัดเลือกโฮสต์ที่มีเสถียรภาพทางพันธุกรรม
|
|
การเก็บรักษาเชื้อ
|
กรณีศึกษา
โฮสต์ที่เหมาะสมเพิ่มระดับการแสดงออกของโปรตีนขึ้น 2.5 เท่า
เราได้รับมอบหมายให้พัฒนาเชื้อที่มีประสิทธิภาพสูง E. coli และเราได้ทดลองใช้โฮสต์เชิงพาณิชย์สามชนิด E. coli ตามลักษณะของโปรตีนเป้าหมาย พบว่าเชื้อ S1-1 และ S1-2 (รูป A: ช่อง 1,2) เพิ่มระดับโปรตีนขึ้น 3.5 เท่าเมื่อเทียบกับเชื้อเริ่มต้นของลูกค้า (รูป A: ช่อง 3)
นอกจากนี้ เชื้อ S1-1 มีเสถียรภาพทางพันธุกรรมสูง (รูป B) และได้รับการยอมรับว่าเป็นเชื้อตัวอย่างสำหรับธนาคารเซลล์ขั้นต้น (PCB)
คุณสมบัติของบริการของเรา
ความเชี่ยวชาญที่ได้รับการพิสูจน์แล้วกับโฮสต์จุลชีพหลากหลาย เช่น E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink สายพันธุ์ 1/2/3/4; S. cerevisiae และ H. polymorpha .
เรามีประสบการณ์ในด้าน E. coli การหลั่งโปรตีนในเพอริพลาซม การแสดงออกแบบละลายได้และการแสดงออกใน inclusion body และการแสดงออกภายในเซลล์หรือการหลั่งในยีสต์ นอกจากนี้เราไม่ใช้ยาปฏิชีวนะ หรือใช้ภายใต้คำแนะนำของกฎระเบียบ
เราสร้างแพลตฟอร์มการคัดกรองความเร็วสูงเพื่อคัดเลือกสายพันธุ์ที่ให้ผลผลิตสูงและเสถียรจากสายพันธุ์ผู้สมัครมากกว่าหนึ่งร้อยสายพันธุ์
มีการรับรองว่ากระบวนการของการออกแบบและคัดเลือกสายพันธุ์สามารถติดตามได้ ภายใต้การจัดการข้อมูลและบันทึกที่ดี
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
