ความสำคัญของการคัดกรองความเครียด
การคัดกรองโฮสต์ที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการพัฒนา CMC ทางชีววิทยา ซึ่งจะกำหนดคุณภาพและความสม่ำเสมอของผลิตภัณฑ์และกระบวนการผลิต วัตถุประสงค์โดยตรงของการคัดกรองโฮสต์คือการจัดหาธนาคารเซลล์ปฐมภูมิ (PCB) ที่เหมาะสม โดยมีระดับการแสดงออกสูงและความเสถียรสูงทั้งในแง่ของความเสถียรของทางเดินและความเสถียรในการจัดเก็บ การคัดกรองโฮสต์ที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็นด้วยเหตุผลสองประการ:
- ขั้นแรก ให้เลือกโฮสต์ของจุลินทรีย์ที่มีระดับการแสดงออกสูง มีสายพันธุ์ที่มีจำหน่ายในท้องตลาดหลายสายพันธุ์ ซึ่งใช้เพื่อแสดงโปรตีนประเภทต่างๆ เช่น โปรตีนที่เป็นพิษ โปรตีนที่ละลายน้ำได้ หรือโปรตีนยูคาริโอต
- ประการที่สอง คัดกรองโฮสต์ที่มีความคงตัวทางพันธุกรรม การทดสอบความคงตัวทางพันธุกรรมเป็นจุดสำคัญตลอดวงจรชีวิตการผลิต มีข้อเสนอแนะว่าความเสถียรทางพันธุกรรมสูงได้รับการยอมรับว่าเป็นคุณลักษณะสำคัญอีกประการหนึ่งสำหรับสายพันธุ์ที่เหมาะสม
คำสำคัญ: การคัดเลือกสายพันธุ์จุลินทรีย์ การคัดกรองสายพันธุ์จุลินทรีย์ การคัดกรองแบคทีเรียหรือยีสต์ที่มีปริมาณงานสูง การคัดกรองสายพันธุ์ที่มีการผลิตสูง การคัดกรองสายพันธุ์ที่มีความเสถียรสูง การคัดกรองสายพันธุ์ที่มีความคงตัวทางพันธุกรรม การใช้งาน: ยาสำหรับมนุษย์ ยาสัตว์ วัคซีน ชีววิทยาสังเคราะห์ รีคอมบิแนนท์โมเลกุลขนาดใหญ่ ชีววิทยา, รีเอเจนต์ทางชีวภาพ
บริการคัดกรองสายพันธุ์ของ Yaohai Bio-Pharma
ด้วยประโยชน์จากประสบการณ์กว่า 10 ปีของ CDMO ในด้านชีววิทยาของจุลินทรีย์ เราสนับสนุนการพัฒนาและการผลิตโมเลกุลขนาดใหญ่ต่างๆ รวมถึงวัคซีนหน่วยย่อยรีคอมบิแนนท์ อนุภาคคล้ายไวรัส (VLP) ฮอร์โมน (อินซูลิน GLP-1 ฮอร์โมนการเจริญเติบโต) ไซโตไคน์ ( อินเตอร์ลิวคิน-2/IL-2, IL-15, IL-21), ปัจจัยการเจริญเติบโต (EGF, FGF, NGF), นาโนบอดี/แอนติบอดีโดเมนเดียว (sdAbs), เอนไซม์ ฯลฯ
เราได้สั่งสมประสบการณ์มากมายในการคัดเลือกพลาสมิดพาหะชนิดต่างๆ และโฮสต์ของจุลินทรีย์ รวมถึงแบคทีเรีย Escherichia coli (อี. โคไล), และยีสต์ Pichia Pastoris (P. Pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha) เราสามารถค้นหาระบบการแสดงออกที่ดีที่สุดสำหรับชีววิทยาเฉพาะของคุณได้
เรารวบรวมโฮสต์จุลินทรีย์ต่างๆ ที่มีแหล่งที่มาชัดเจนและมี CoA มาตรฐาน ได้แก่ E.coli การแสดงออกและการแสดงออกของยีสต์
รายละเอียดบริการ
บริการ
|
รายละเอียดบริการ
|
ระยะเวลาขั้นต่ำ/วัน
|
การส่งมอบ
|
โครงสร้างสายพันธุ์ (E. coli)
|
การแปลงพลาสมิด (หลายโฮสต์)
|
5
|
COA ของโฮสต์เชิงพาณิชย์รายงานการก่อสร้างความเครียด
|
การตรวจสอบ PCR
|
การทำให้บริสุทธิ์สายพันธุ์
|
การเก็บรักษาสายพันธุ์
|
โครงสร้างสายพันธุ์ (ยีสต์)
|
การเตรียมเซลล์ยีสต์ที่มีความสามารถ
|
10
|
พลาสมิดเชิงเส้น
|
การเปลี่ยนแปลงทางไฟฟ้า
|
คัดกรองภาวะดื้อยา/ขาดสารอาหาร
|
การทำให้บริสุทธิ์สายพันธุ์
|
การเก็บรักษาสายพันธุ์
|
การคัดกรองโฮสต์ที่เหมาะสม
|
การสกัดพลาสมิดหรือจีโนมดีเอ็นเอ
|
15-20
|
กระบวนการคัดกรองโฮสต์COA ของสายพันธุ์ที่ได้รับการออกแบบทางวิศวกรรม
|
การตรวจสอบ PCR การจำกัดการย่อยของเอนไซม์
|
การจัดลำดับยีนเป้าหมาย
|
การคัดกรองโฮสต์ที่มีการแสดงออกสูง
|
การคัดกรองโฮสต์ที่มีความคงตัวทางพันธุกรรม
|
การเก็บรักษาสายพันธุ์
|
กรณีศึกษา
โฮสต์ที่เหมาะสมช่วยเพิ่มระดับการแสดงออกของโปรตีนได้ 2.5 เท่า
เราได้รับมอบหมายให้พัฒนาการผลิตที่สูง E. coli ความเครียด. และเราลองใช้โฆษณาสามประเภท E. coli เจ้าภาพ ขึ้นอยู่กับลักษณะของโปรตีนเป้าหมาย แสดงให้เห็นว่าสายพันธุ์ S1-1 และ S1-2 (รูปที่ A: เลน 1,2) ปรับปรุงระดับโปรตีนเป็น 3.5 เท่ามากกว่าสายพันธุ์เริ่มต้นของลูกค้า (รูปที่ A: เลน 3)
นอกจากนี้ สายพันธุ์ S1-1 ยังมีความคงตัวทางพันธุกรรมสูง (รูปที่ B) และได้รับการยอมรับว่าเป็นสายพันธุ์ที่เหมาะสมกับการทำธนาคารเซลล์ปฐมภูมิ (PCB)
คุณสมบัติการบริการของเรา
แสดงให้เห็นถึงความเชี่ยวชาญกับโฮสต์จุลินทรีย์ต่างๆ เช่น E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; ป. ศิษยาภิบาล SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink สายพันธุ์ 1/2/3/4; S.cerevisiae และ เอช. โพลีมอร์ฟา.
เรามีประสบการณ์กับ E. coli การหลั่งของ periplasmic การแสดงออกของร่างกายที่ละลายน้ำได้และการรวมตัวตลอดจนการแสดงออกของยีสต์ในเซลล์หรือการหลั่ง เราไม่เติมยาปฏิชีวนะหรือเพิ่มยาปฏิชีวนะภายใต้คำแนะนำด้านกฎระเบียบ
เราสร้างแพลตฟอร์มการคัดกรองปริมาณงานสูงเพื่อคัดกรองสายพันธุ์ที่มีการผลิตสูงและมีเสถียรภาพจากสายพันธุ์ผู้สมัครมากกว่าหนึ่งร้อยสายพันธุ์
ช่วยให้มั่นใจได้ว่ากระบวนการทางวิศวกรรมความเครียดและการคัดกรองสามารถตรวจสอบย้อนกลับได้ ภายใต้การจัดการข้อมูลและบันทึกที่ดี