การทำโปรไฟล์ N-glycans เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการผลิตชีวเภสัชภัณฑ์ Yaohai Bio-Pharma ให้บริการจัดทำโปรไฟล์ N-glycan โดยใช้ Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) ของ glycans ที่ปล่อยออกมาและติดฉลาก ขั้นตอนทั่วไปในการเตรียมตัวอย่าง N-ไกลแคน ได้แก่ การย่อยไกลโคโปรตีน (GP), ดี-ไกลโคซิเลชัน, การทำให้บริสุทธิ์, การติดฉลาก/การทำให้เป็นอนุพันธ์ และการสกัดเฟสของแข็ง (SPE)
เรามีส่วนร่วมในการระบุลักษณะโครงสร้างโปรตีนของโมเลกุลขนาดใหญ่ต่างๆ รวมถึงวัคซีนหน่วยย่อยชนิดรีคอมบิแนนท์ นาโนบอดี/VHHs/ แอนติบอดีโดเมนเดียว (sdAbs) ชิ้นส่วนแอนติบอดี ฮอร์โมน/เปปไทด์ ไซโตไคน์ ปัจจัยการเจริญเติบโต (GF) เอนไซม์ คอลลาเจน ฯลฯ
ข้อกำหนดด้านกฎระเบียบสำหรับการทำโปรไฟล์ N-Glycan
ตามแนวทางของ ICH Q6B “สำหรับไกลโคโปรตีน ปริมาณคาร์โบไฮเดรต (น้ำตาลที่เป็นกลาง น้ำตาลอะมิโน และกรดเซียลิก) จะถูกกำหนด นอกจากนี้ โครงสร้างของสายโซ่คาร์โบไฮเดรต รูปแบบโอลิโกแซ็กคาไรด์ (โปรไฟล์ปัตตาเลี่ยน) และตำแหน่งไกลโคซิเลชันของสายโพลีเปปไทด์ได้รับการวิเคราะห์ในขอบเขตที่เป็นไปได้
วิธีวิเคราะห์
| การวิเคราะห์ |
วิธีการ |
| การทำโปรไฟล์ N-ไกลแคน |
การวิเคราะห์โครมาโตกราฟีของเหลว-แมสสเปกโตรเมทรี (LC-MS) ของไกลแคนที่ปล่อยออกมาและติดฉลาก |
ขั้นตอนการ
1. การปลดปล่อยเอนไซม์ไกลแคนด้วย Peptide N-Glycosidase F (PNGase F)
2. อนุพันธ์ของไกลแคนที่ปล่อยออกมาโดย 2-aminobenzamide (2-AB)
3. การทำ N-ไกลแคนที่เก็บเกี่ยวให้บริสุทธิ์บนคอลัมน์ TSK Amide - 80 หากมีผงซักฟอก เกลือที่ไม่ระเหย หรือวัสดุที่มีหมู่อะมิโนอิสระในปริมาณมาก
4. การติดฉลากด้วยฟลูออเรสเซนต์ 2-อะมิโนเบนซาไมด์ (2-AB)
5. การวิเคราะห์ LC-MS ของ N-glycans ที่มีป้ายกำกับ
6 การวิเคราะห์ข้อมูล
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
