ผลิตภัณฑ์ที่ได้จากการหมุนเวียนในหลอดทดลองและการเสริมความเข้มข้นด้วย RNase R จำเป็นต้องกำจัดสารอื่นๆ จากกระบวนการถอดรหัสแบบ in vitro (IVT) อีกครั้ง รวมถึงสารตั้งต้นที่ไม่ถูกใช้งานหมดในปฏิกิริยาม้วนกลับ ผลพลอยได้จากปฏิกิริยา และ RNA ที่มีรอยแตก
Yaohai Bio-Pharma มีวิธีการสกัดที่หลากหลาย เช่น การตกตะกอนด้วย LiCl การสกัดด้วยเม็ดแม่เหล็ก รวมถึงวิธีการสกัดที่พัฒนาขึ้นเอง ซึ่งสามารถกำจัดสิ่งปนเปื้อนต่างๆ ได้อย่างมีประสิทธิภาพและเตรียม circRNA ที่มีความบริสุทธิ์สูง
โซลูชันการสกัดสำหรับ circRNA ปริมาณเล็กน้อยเพื่อใช้ในการปลูกถ่ายเซลล์และเป็นส่วนหนึ่งของการทดลองในสัตว์
โซลูชันการสกัดสำหรับ circRNA ปริมาณเล็กน้อยเพื่อใช้ในการปลูกถ่ายเซลล์และเป็นส่วนหนึ่งของการทดลองในสัตว์
สถานการณ์การใช้งานที่มีคุณภาพสูงกว่า;
กระบวนการฟอกที่เสถียรและสามารถปรับขนาดได้เพื่อตอบสนองข้อกำหนดการผลิต GMP
กระบวนการ | บริการเพิ่มเติม | รายละเอียดบริการ | ระยะเวลาส่งมอบ (วัน) | สิ่งที่จะได้รับ |
circRNApurification | วิธีการฟอกปกติ | การตกตะกอนด้วยลิเธียมคลอไรด์ | 1 | สารออกฤทธิ์ circRNA |
การแยกด้วยเม็ดแม่เหล็ก | ||||
การแยก circRNA ที่บริสุทธิ์สูง | โครมาโทกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงสำหรับการเตรียมตัวอย่าง (HPLC) | 1-2 | ||
การเปลี่ยนบัฟเฟอร์ | การกรองสูง | 1 | ||
การควบคุมคุณภาพ circRNA | การเข้มข้น / แยกส่วน | การวัดด้วยเครื่อง Spectrophotometry รังสีอัลตราไวโอเลต (UV) | 0.5 | รายงานผลการทดสอบ |
ความบริสุทธิ์ | การแยกด้วยเจลอะไกโรส (AGE)/E-Gel | |||
HPLC-ตัวเลือก | 1 |
สามารถใช้งานในสถานการณ์ต่าง ๆ ได้
circRNA ที่มีความบริสุทธิ์มากกว่า 90%;
ผ่านการควบคุม RNases ในสภาพแวดล้อมการทดลองและอุปกรณ์ใช้แล้วทิ้งอย่างเข้มงวด การเสื่อมสภาพของ RNA จึงถูกป้องกันอย่างมีประสิทธิภาพ
Yaohai Bio-Pharma ได้พัฒนาวิธีการแยก circRNA ที่สุกงอมแล้ว ซึ่งสามารถกำจัดสารปนเปื้อนที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการต่างๆ ได้อย่างมีประสิทธิภาพ
ผลิตภัณฑ์ circular RNA ที่แยกด้วยวิธีปกติยังคงปนเปื้อนด้วย RNA ที่มีรอยแตกและอินตรอนอย่างชัดเจน
หลังจากใช้วิธีการแยกที่พัฒนาโดย Yaohai Bio-Pharma สารปนเปื้อน linear RNA ต่างๆ เช่น RNA ที่มีรอยแตกและอินตรอน สามารถกำจัดออกได้สำเร็จ
การตรวจสอบการแสดงออกของ circRNA
เมื่อใช้ลิโพโซมแบบปกติในการนำ eGFP circRNA ที่ผ่านการแยกเข้าสู่เซลล์ 293T จะเห็นสัญญาณฟลูออเรสเซนซ์หลังจาก 24 ชั่วโมง และยังคงเพิ่มขึ้นในเวลา 48 ชั่วโมง สัญญาณฟลูออเรสเซนซ์ยังสามารถตรวจพบได้ในวันที่ 7 และวันที่ 14 หลังจากการนำเข้า