หมวดหมู่ทั้งหมด
ENEN
mRNA การกำหนดเอนไซม์

mRNA การกำหนดเอนไซม์ ประเทศไทย

หน้าแรก >  IVT อาร์เอ็นเอ  >  การสังเคราะห์ RNA แบบกำหนดเอง  >  การสังเคราะห์ mRNA แบบกำหนดเอง  >  mRNA การกำหนดเอนไซม์

IVT อาร์เอ็นเอ

mRNA การกำหนดเอนไซม์

การกำหนดสูงสุดที่ 5'-end เป็นการปรับเปลี่ยน mRNA ที่สำคัญ mRNA ที่มีโครงสร้างแคป โดยเฉพาะโครงสร้าง Cap1 ช่วยให้ mRNA หลบเลี่ยงการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติ ในร่างกาย ส่งผลให้การแปลโปรตีนมีประสิทธิภาพ

การปิดฝาด้วยเอนไซม์ (วิธีสองขั้นตอน) เป็นวิธีการทั่วไปของการปิดฝา mRNA ซึ่งคล้ายกับกระบวนการปิดฝาในสิ่งมีชีวิตยูคาริโอต ภายใต้การกระทำของเอนไซม์ชุดหนึ่ง 7-methylguanine (m7G) เชื่อมโยงกับ mRNA ที่ปลาย 5'-end ผ่านพันธะไตรฟอสเฟต 5'-5' และผ่านการดัดแปลงเมทิลเลชันเพื่อสร้างโครงสร้างหมวก Cap 1 (m7GpppN)

ไม่ได้กำหนด

แผนภาพแสดงการสร้างโครงสร้างหมวกตามธรรมชาติ

การไหลของปฏิกิริยาปิดฝาด้วยเอนไซม์จะเป็นดังนี้:

DNA พลาสมิดเชิงเส้นถูกใช้เป็นเทมเพลตสำหรับการถอดรหัสภายนอกร่างกาย (IVT) โดยมี T7 โพลีเมอเรส และ mRNA ที่มีโครงสร้างปลายหมวกขนาด 5 ฟุตจะเกิดขึ้นหลังจากการทำให้บริสุทธิ์ในขั้นตอนเดียวโดยใช้เอนไซม์ปิดฝาวัคซีนและ 2'-O -เมทิลทรานสเฟอเรส

ไม่ได้กำหนด

รายละเอียดบริการ

บริการเสริม

รายละเอียดบริการ

ระยะเวลาจัดส่ง (วัน)

การปิดฝาเอนไซม์ mRNA

ปฏิกิริยาการกักเก็บด้วยเอนไซม์

1

การเพิ่มประสิทธิภาพปฏิกิริยาสูงสุดที่กำหนด - ไม่จำเป็น

การออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพส่วนประกอบของปฏิกิริยา

3 ~ 7
คุณสมบัติของเรา
  • การออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพของส่วนประกอบปฏิกิริยาที่กำหนด

ส่วนประกอบปฏิกิริยาการจำกัดได้รับการปรับปรุงให้เหมาะสม และการผลิตการถอดเสียง mRNA เพิ่มขึ้นอย่างมาก

  • การตรวจสอบการแสดงออก ในหลอดทดลอง

mRNA ที่ต่อยอดจะถูกแปลงร่างเป็นเซลล์ 293T และสามารถตรวจพบการแสดงออกของโปรตีนเป้าหมายได้

  • การควบคุม RNase อย่างเข้มงวด

ด้วยการควบคุมสภาพแวดล้อมการทดลอง RNaseson และวัสดุสิ้นเปลืองอย่างเข้มงวด จึงสามารถป้องกันการย่อยสลาย mRNA ได้อย่างมีประสิทธิภาพ

กรณีศึกษา

แพลตฟอร์ม mRNA ของ Yaohai Bio-Pharma ได้สร้างกระบวนการปฏิกิริยาปิดฝาที่สมบูรณ์แบบ

สำหรับ eGFP mRNA ผลิตภัณฑ์สำเร็จรูป mRNA ที่เตรียมโดยการปิดฝาด้วยเอนไซม์ สัญญาณเรืองแสง eGFP (เรืองแสงสีเขียว) ที่ระดับสูงสามารถสังเกตได้หลังจากการทรานส์เฟกเซลล์ 293T เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ซึ่งตรวจพบโดย Western Blot (WB) ซึ่งแสดงให้เห็นว่า โปรตีนเป้าหมายที่เสริมโปรตีนเรืองแสงสีเขียว (eGFP) สามารถแสดงออกในหลอดทดลองได้อย่างมีประสิทธิภาพ

图片

图片

การแสดงออกของ eGFP mRNA ที่ต่อยอดด้วยเอนไซม์ในเซลล์ 293T

กดรับใบเสนอราคา

ติดต่อเรา