การเตรียม CircRNA จำเป็นต้องใช้ RNA สายตรงเป็นสารตั้งต้น (RNA precursor) สำหรับกระบวนการ cyclization โดยปกติแล้ว RNA precursor จะถูกเตรียมขึ้นโดยใช้ DNA พลาสมิดที่ตัดเป็นเส้นตรงเป็นเทมเพลตในการถอดรหัสในหลอดทดลอง พร้อมด้วยความช่วยเหลือของ T7 RNA polymerase
DNA พลาสมิดคุณภาพสูงเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการถอดรหัสในหลอดทดลอง (IVT) โดยอาศัยแพลตฟอร์มบริการเตรียมพลาสมิดที่พัฒนาอย่างครบถ้วน Yaohai Bio-Pharma สามารถให้บริการเตรียม DNA พลาสมิดที่ตัดเป็นเส้นตรง (pDNA) ที่มีความบริสุทธิ์สูงและมาตรฐาน เพื่อให้มั่นใจในความสมบูรณ์ของผลิตภัณฑ์ IVT
รายละเอียดบริการ
| กระบวนการ |
บริการเพิ่มเติม |
รายละเอียดบริการ |
ระยะเวลาส่งมอบ (วันทำงาน) |
| การเตรียมพลาสมิดวงกลม |
การสังเคราะห์ยีน |
การสังเคราะห์ยีน (จากบุคคลที่สาม) |
7-10 |
| การเพิ่มปริมาณพลาสมิด |
การเพิ่มปริมาณพลาสมิด |
2 |
| การสกัดพลาสมิด |
| การเตรียมพลาสมิดเชิงเส้น |
การทำให้พลาสมิดเป็นเส้นตรงและการฟอกแยก |
การแปลงพลาสมิดให้เป็นเส้นตรง |
1 |
| การฟอกแยกดีเอ็นเอเชิงเส้น |
| การควบคุมคุณภาพดีเอ็นเอพลาสมิด |
ความเข้มข้นและความบริสุทธิ์ |
การวัดด้วยเครื่อง Spectrophotometry รังสีอัลตราไวโอเลต (UV) |
1-2 |
| รูปแบบ Plasmid |
การแยกไฟฟ้าเจลอะแกโรส (AGE) |
| การแยกแบบแคปิลารี (CE)-ตัวเลือก |
| ระบุพลาสมิด |
ระบุเอนไซม์จำกัด/ AGE |
คุณลักษณะของเรา
การเลือกวิธีการทำให้เป็นเส้นได้อย่างยืดหยุ่น
การปรับปรุงวิธีการสกัดและการทำให้บริสุทธิ์ของ DNA เพื่อให้ได้อัตราการกู้คืนสูง
- การควบคุมคุณภาพอย่างเข้มงวด
มาตรฐานการควบคุมกระบวนการที่เข้มงวด อัตราการคอนฟอร์มซูเปอร์ฮีลิกซ์ของตัวอย่างพลาสมิดสำหรับการวิจัยมากกว่า 80%.
- กระบวนการแพลตฟอร์มที่เก่าแก่และเชี่ยวชาญ
บริการเตรียมพลาสมิดและควบคุมคุณภาพที่มีมาตรฐานสูงและมีประสิทธิภาพสูงเพื่อตอบสนองความต้องการของการทดลอง
กรณีศึกษา
ยกตัวอย่างผลิตภัณฑ์ mCherry circRNA จาก Yaohai Bio-Pharma สัดส่วนของซุปเปอร์คอยล์ในตัวอย่างพลาสมิดเทมเพลตสำหรับการทรานสคริปชัน (ระดับวิจัย) มีมากกว่า 70% โดยมีอัตราการไลนีย์ใกล้เคียง 100%
mCherry circRNA ถูกเตรียมขึ้นโดยใช้พลาสมิดที่ผ่านการไลนีย์เป็นเทมเพลต และถูกทรานเฟคเข้าสู่เซลล์ 293T การแสดงออกของฟลูออเรสเซนซ์ในระดับสูง (ฟลูออเรสเซนซ์สีแดง) ถูกตรวจพบหลังจากทรานเฟค 24 ชั่วโมง และจะเพิ่มขึ้นหลังจาก 48 ชั่วโมง ยังสามารถตรวจพบได้ในวันที่ 7 และวันที่ 14 หลังจากการทรานเฟค
โปรตีน mCherry ถูกแสดงออกอย่างเสถียรและมีประสิทธิภาพสูง และความบริสุทธิ์ของเทมเพลตการทรานสคริปชันสามารถตอบสนองความต้องการของผลิตภัณฑ์ยา circRNA คุณภาพสูง (DP)
การตรวจสอบการแสดงออกใน vitro ของ mCherry circRNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
