ตามความเชื่อหลัก Messenger RNA (mRNA) เป็นสะพานสำหรับการถ่ายทอดสารพันธุกรรมจาก DNA ไปยังโปรตีน
mRNA มีบทบาททางชีววิทยาโดยการเข้ารหัสโปรตีนในร่างกาย และ mRNA ที่เจริญเต็มที่ในสิ่งมีชีวิตยูคาริโอตประกอบด้วยห้าองค์ประกอบ: 5' Cap (โครงสร้างหมวก), 5' UTR (บริเวณที่ไม่มีการเข้ารหัส), ORF (กรอบการอ่านแบบเปิด), 3ʹ UTR และส่วนท้ายโพลีอะดีนีเลตขนาด 3 ฟุต (ส่วนท้ายโพลีอะดีนีเลต)
กระบวนการ | บริการเสริม | รายละเอียดบริการ | ระยะเวลาจัดส่ง (วัน) |
การออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพลำดับ mRNA | การออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพลำดับการเข้ารหัส |
การจัดตำแหน่งลำดับ CDS การเพิ่มประสิทธิภาพรหัส CDS |
1 |
การออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพของลำดับที่ไม่เข้ารหัส |
การออกแบบลำดับ UTR และการเพิ่มประสิทธิภาพ 5' การออกแบบลำดับ UTR และการเพิ่มประสิทธิภาพ 3' การออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพลำดับ polyA |
1-2 |
5'UTR/3'UTR |
|
หางโพลีเอ 3' |
|
ส่วนประกอบ mRNA | ฟังก์ชั่นทางชีวภาพ | กลยุทธ์การเพิ่มประสิทธิภาพ |
5' ฝาครอบ | ปกป้อง mRNA จากการย่อยสลายโดยเอ็กโซนิวคลีเอสและออกฤทธิ์ร่วมกับส่วนท้ายของ polyA ที่ปลาย 3', โปรตีนที่ยึดจับโพลีเอ และโปรตีนปัจจัยการเริ่มต้นการแปลเพื่อเริ่มต้นการแปลโปรตีน | โครงสร้าง Cap1 ตามธรรมชาติจะหลีกเลี่ยงการรับสัญญาณการจดจำรูปแบบ และลดการตอบสนองภูมิคุ้มกันตามธรรมชาติ ซึ่งสามารถทำได้โดยการปิดล้อมร่วมการถอดรหัสแบบขั้นตอนเดียวหรือการปิดล้อมด้วยเอนไซม์สองขั้นตอน [ดูการปิดล้อมด้วยเอนไซม์ mRNA และการปิดล้อมร่วมการถอดรหัสเพื่อดูรายละเอียด] |
5' UTR | UTR ขนาด 5' สามารถรับรู้ได้โดยไรโบโซม ควบคุมการแปล mRNA และส่งผลต่อความเสถียรของ mRNA | มีลำดับ Kozak โดยไม่มีโครงสร้างรองที่เสถียรมาก UTR ตามธรรมชาติของยีนที่แสดงออกอย่างมากเป็นที่พึงประสงค์สำหรับ mRNA การถอดรหัสภายนอกร่างกาย (IVT) เช่น α-โกลบินและ β-โกลบิน |
CDS | บริเวณที่กำหนดรหัสโปรตีนและลำดับกำหนดรหัสสำหรับแอนติเจน, แอนติบอดีหรือโปรตีนเชิงฟังก์ชันอื่นๆ | การหาค่าเหมาะที่สุดของโคดอนจะเพิ่มระดับการแปล โดยสังเกตว่าโคดอนที่ไม่เหมาะสมบางตัวอาจมีบทบาทในการพับโปรตีน |
3' UTR | ควบคุมการแปล mRNA และความเสถียร | UTR ตามธรรมชาติของยีนที่แสดงออกอย่างมากเป็นที่ต้องการสำหรับ IVT mRNA เช่น α-globin และ β-globin |
หางโพลีเอ 3 ฟุต | ควบคุมการแสดงออกของโปรตีนและปกป้องโครงสร้างของหมวกจากการย่อยสลาย | ต้องมีความยาวเพียงพอ (100-150 bp) การเข้ารหัสส่วนท้ายของ polyA บนพลาสมิดของเทมเพลตการถอดความช่วยให้มั่นใจได้ถึงความยาวส่วนท้ายของ polyA ที่กำหนดไว้มากขึ้น |
แหล่งที่มาหลายแห่งของไลบรารี UTR ที่เป็นธรรมชาติและได้รับการแก้ไขอย่างมาก กลยุทธ์การปรับเปลี่ยน UTR ที่เป็นผู้ใหญ่
ร่วมมือกับทีมอัลกอริธึม AI มืออาชีพเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพโค้ดให้สมบูรณ์
เพิ่มลำดับ polyA ตามเทมเพลต DNA เพื่อควบคุมความยาว mRNA ได้แม่นยำยิ่งขึ้น
บรรลุการแสดงออกที่มีประสิทธิภาพของ mRNA โดยมีภูมิคุ้มกันต่ำ
การออกแบบลำดับของ mRNA ของผู้รายงานคู่: mCherry-eGFP mRNA
บริการ mRNA ของ Yaohai Bio-Pharma ยังคงได้รับการอัปเกรดด้วยการออกแบบและการเพิ่มประสิทธิภาพของลำดับยีนนักข่าวคู่ ซึ่งทำให้สามารถแสดงออกร่วมกันของยีนคู่ได้
การใช้รีเอเจนต์การทรานส์เฟกชันแบบธรรมดา mRNA ลำดับคู่ของยีน mCherry-eGFP จะถูกแปลงร่างเป็นเซลล์ 293T และตรวจพบสัญญาณฟลูออเรสเซนต์สองตัวของ mCherry (สีแดง) และโปรตีนเรืองแสงสีเขียวที่ได้รับการปรับปรุง (eGFP) ด้วยการแสดงออกพร้อมกันหลังจาก 48 ชั่วโมง และสแต็ก กราฟจะเน้นด้วยสีเหลือง
การแสดงออกของ mCherry-eGFP mRNA ในเซลล์ 293T