โปรตีเนสสำหรับการลบแท็ก
เพื่อเพิ่มความละลายน้ำและลดขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีน рекомбинันท์ นักวิจัยมักจะเพิ่มแท็กฟิวชั่น เช่น His-tag, โปรตีนผูกมัลโตส (MBP) และกลูตาไธโอน-S-ทรานسفيرเรส (GST) ซึ่งเป็นที่ใช้กันอย่างแพร่หลาย
แม้ว่าแท็กจะถูกเพิ่มเป็นลำดับโปรตีนเสริม แต่จำเป็นต้องถอดออกเพื่อรักษาการทำงานทางชีวภาพในอุตสาหกรรมเภสัชภัณฑ์ การถอดแท็กฟิวชั่นต้องใช้เอนไซม์โปรตีเอสที่ระบุตำแหน่งเฉพาะ เช่น เอนเทอร์โรไคนาเซ (EK), ธรมบิน, เอนไซม์โปรตีเอสจากไวรัสทับเบิ้ลเอ็ทช์ (TEVp), เอนไซม์โปรตีเอส 3C จากไวรัสหวัดมนุษย์ (HRV3C), เอนไซม์โปรตีเอส SUMO, เอนไซม์โปรตีเอสจากไวรัสเว้นโมตติ้ง (TVMV) และคาร์บอกซีเพปไทด์ A/B (CPA/CPB)
ประเภท
|
เอนไซม์
|
ตำแหน่งการรู้จำ
|
เอนไซม์ตัดปลายภายใน
|
เอนเทอร์โอคิเนส (EK), เอนเทอร์โอเปปไทด์
|
DDDDK↓
|
ทรอมบิน
|
LVPR↓GS
|
โปรตีเอส TEV
|
ENLYFQ↓G
|
โปรตีเอส HRV3C
|
LEVLFQ↓GP
|
โปรตีเอส SUMO
|
โครงสร้างลำดับที่สามของ SUMO
|
โปรตีเอส TVMV
|
ETVRFQG↓S
|
เอ็กโซโปรตีเอสสำหรับการลบแท็ก
|
คาร์บอกซีเพปไทด์ A (CPA)
|
กรดอะมิโนปลาย C ยกเว้น Pro, Lys และ Arg
|
คาร์บอกซีเพปไทด์ B (CPB)
|
Lys และ Arg ปลาย C
|
โปรตีเอสชนิดอื่น ๆ
การใช้งาน
|
เอนไซม์
|
ฟังก์ชัน
|
โปรตีเอสชนิดอื่น ๆ
|
โปรตีเนส K
|
เอนไซม์โปรตีเนสที่ย่อยโปรตีนโดยการไฮโดรไลซิสพีปไทด์บอนด์
|
IdeS, ไอจีจีโปรตีเนส
|
เอนไซม์ที่ทำลาย IgG (Ides) โดยตัดที่ตำแหน่งเฉพาะของอิมมูโนโกลบูลิน G (IgG) เพื่อสร้างฟragments Fab และ Fc
|
IgA1 โปรตีเนส
|
เอนไซม์โปรตีโอไลติกที่ตัดไซต์เฉพาะในลำดับโซนฮิงจ์ของอิมมูโนโกลบูลินเอ 1 (IgA1) ในมนุษย์
|
นิวคลีเอส
การใช้งาน
|
เอนไซม์
|
ฟังก์ชัน
|
นิวคลีเอส
|
นิวคลีเอส
|
ตัดกรดนิวคลีอิก (DNA หรือ RNA) โดยการไฮโดรไลซิสพันธะฟอสโฟไดเอสเทอร์
|
เรสทริกท์ เอนไซม์
|
เอนโดนิวเคลียสที่ตัด DNA ที่หรือใกล้กับตำแหน่งเฉพาะ
|
อะไมด์เดส
การใช้งาน
|
เอนไซม์
|
ฟังก์ชัน
|
อะไมด์เดส
|
PNGase F
|
ตัดระหว่างกลูโคไนแอคและสารพาราชีนในกลุ่มคาร์โบไฮเดรตชนิดไฮบริดและซับซ้อน
|
ยาหǎй ไบโอ-ฟาร์มา นำเสนอวิธีการแก้ปัญหา CDMO แบบครบวงจรสำหรับเอนไซม์ตัวอย่าง