Proteaze za odstranjevanje oznak
Da bi izboljšali topnost in poenostavili postopek čiščenja rekombinantnih proteinov, raziskovalci običajno dodajajo fuzijske oznake, od katerih se običajno uporabljajo His-tag, protein, ki veže maltozo (MBP) in glutation-S-transferaza (GST).
Čeprav je označeno kot dodatno zaporedje beljakovin, ga je treba odstraniti, da se ohrani biološka aktivnost v farmacevtski industriji. Za odstranitev fuzijskih oznak so potrebne proteaze, specifične za mesto, kot so enterokinaza (EK), trombin, proteaza virusa jedkanja tobaka (TEVp), proteaza 3C človeškega rinovirusa (HRV3C), proteaza majhnega ubikvitin modificirajočega proteina (SUMO), virus pegavosti tobačnih žil ( TVMV) proteazo in karboksipeptidazo A/B (CPA/CPB).
tip
|
Encim
|
Prepoznavno mesto
|
Endoproteaze za odstranjevanje oznak
|
Enterokinaza (EK), Enteropeptidaza
|
DDDDK↓
|
Trombin
|
LVPR↓GS
|
TEV proteaza
|
ENLYFQ↓G
|
HRV3C proteaza
|
LEVLFQ↓GP
|
SUMO proteaza
|
SUMO terciarna struktura
|
TVMV proteaza
|
ETVRFQG↓S
|
Eksoproteaze za odstranjevanje oznak
|
karboksipeptidaza A (CPA)
|
C-terminalne aminokisline, razen Pro, Lys in Arg
|
Karboksipeptidaza B (CPB)
|
C-terminalni Lys in Arg
|
Druge proteaze
uporaba
|
Encim
|
funkcija
|
Druge proteaze
|
Proteaza K
|
Serinska proteaza, ki prebavlja beljakovine s hidrolizacijo peptidnih vezi.
|
IdeS, IgG proteaza
|
Encimi za razgradnjo IgG (Ides), ki cepijo na specifičnem mestu imunoglobulina G (IgG), pri čemer nastanejo fragmenti Fab in Fc
|
IgA1 proteaza
|
Proteolitični encim, ki cepi specifično mesto v sekvenci tečajne regije humanega imunoglobulina A1 (IgA1).
|
Nukleaza
uporaba
|
Encim
|
funkcija
|
Nukleaza
|
Nukleaza
|
Cepi nukleinske kisline (DNK ali RNK) s hidrolizacijo fosfodiestrskih vezi.
|
Omejite encim
|
Endonukleaza, ki cepi DNA na določenih mestih ali blizu njih.
|
Amidaza
uporaba
|
Encim
|
funkcija
|
Amidaza
|
PNGase F
|
Cepi med najbolj notranjimi GlcNAc in asparaginskimi ostanki visoko manoze, hibridnih in kompleksnih oligosaharidov.
|
Yaohai Bio-Pharma ponuja vsestransko rešitev CDMO za encimski reagent