Plazmidna DNA, kot v laboratoriju transkripcija (IVT) je pomemben surovin za proizvodnjo mRNA. Visoka dobitnost, visoka čistota in visoka izdelava plazmidne DNA je glavni cilj med razvojem procesa plazmida.
Yaohai Bio-Pharma ponuja enočasno rešitev za razvoj plazmida, vključno z gornjo točko (fermentacija), spodnjo točko (čiščenje) procesa razvoja, karakterizacijo procesa in validacijo procesa. Imamo obsežen izkušenj s povečevanjem plazmida in njegovo ločevanje iz kompleksnih matrik s razvojem in optimizacijo fermentacije, procesov čiščenja in odstranitve nečistin.
Osnovni bioproces za proizvodnjo plazmida vključuje: Escherichia coli (E. coli) fermentacija, poškub celic in alkalna liza, pojasnitev, koncentracija, trihkorakski proces kromatografije (hitek, medsebojni čiščenje, in poliranje), ter koncentracija.
Podrobnosti storitev | Enote delovanja | Parametri |
E. coli fermentacija |
Stresna flaka | Sestava sredstva, antibiotikum, prostornina inkubata, temperatura rasti in drugo. |
Fermentator (7 L) |
Antibiotikum, prostornina inkubata, temperatura rasti, pH, raztopljeni kisik (DO), način hrane (npr. fed-batch), hranilno sredstvo, čas fermentacije in drugo. |
|
Osebje celic | Mikrofiltracija | Standard E. coli skupaj proces |
Liho celic | Ponovno raztopitev celic, alkalna liho, neutralizacija | Odnos alkali, čas likovanja |
Počiščenje | Filtracija | Hruba filtracija, 20 µm in 5 µm filter (predpisano) |
Koncentracija | Ultrafiltracija, tangencialno točno filtriranje | Velikost por (ali NMWC), Transmembranski tlak (TMP), Flux, odnos obema filtrata do ploščine membrane |
Tri korake kromatografije | Kromatografija z velikostno izključitvijo (SEC) ali gel filtracijska kromatografija (GFC) | Dolžina in premer stolpa, sestava buferja, prostornina vstavljanja, sestava mobilne faze (absorpcija in desorpcija), pH, hitrost toka, enakomerjevanje, povezovanje, umivanje in pogoji eluciranja. |
Afiniteta kromatografija (AF) | ||
Anionska izmenična kromatografija (AEX) | ||
Koncentracija | Ultrafiltracija, tangencialno točno filtriranje | Velikost por (ali NMWC), Transmembranski tlak (TMP), Flux, odnos obema filtrata do ploščine membrane |
Več rešitev za proces očiščevanja biologov |