mRNA se široko uporablja pri raziskovanju funkcij genov ali beljakovin. Hkrati pa je običajna pri razvoju preventivnih in terapevtskih biologij. Kot skupna strategija za sintezo RNA molekul omogoča transkripcija v oprostovalniku (IVT) učinkovito pridobitev prilagojenih transkriptov.
Yaohai Bio-Pharma je vzpostavila serijo tehnologij za sintezo mRNA, ki omogočajo visokokakovostne RNA, kot so načrtovanje in optimizacija zaporedij, IVT, počistitev, sušenje in zapolnitev z lipidnimi nanocesticami (LNP). Vse izdelke izdajamo pod strogi standardi kakovostnega nadzora (QC).
Z izbruhom pandemije COVID-19 leta 2020 je mRNA tehnologija napredovala v ogromnih korakih, povezana raziskovanja in uporabe so dosegla neverjeten razvoj, vključno z preventivnimi ceplji za preprečevanje okužb s kmeti, terapevtskimi ceplji in zdravili v boju proti raku, terapijo tumora, zamenjavno terapijo proteinov, regenerativno medicino in celulsko ter genejsko terapijo (CGT).
cRNA cepivo | mRNA Terapeutika |
|
Proces | Izbirne storitve | Podrobnosti storitev | Doba dostave (delovni dan) | Rezultat |
načrtovanje in optimizacija mRNA zaporedij | Načrtovanje in optimizacija kodirnih zaporedij | Dizajn CDS zaporedij in optimizacija kodonov | 1-3 | Datoteka zaporedja |
Dizajn in optimizacija nekodirujočih zaporedij | Dizajn in optimizacija UTR, poliA zaporedij | |||
Priprava transkripcije predložne plazmidne DNA | Priprava rekombinantnih plazmidov | Sinteza gena | 7-10 | |
Amplifikacija in ekstrakcija plazmidne DNA | 4 | |||
Linearnizacija in očiščanje plazmidne DNA | ||||
transkripcija mRNA v testni cevi | Kove transkripcijsko zakrivanje (enokorak methoda) | Transkripcija v testni cevi (IVT) / Cap analog | 1-2 | N/A |
Spremembe nukleotidov (spremembe UTP/CTP) | ||||
Odstranitev DNS predloge (DNase I) | ||||
Enzimatsko zakrpanje (dvokorakov proces) | IVT | 2-3 | ||
Spremembe nukleotidov (spremembe UTP/CTP) | ||||
Odstranitev DNS predloge (DNase I) | ||||
ciscenje mRNA (litijev klorid/magnetna sfera) | ||||
Enzimatsko zakrpanje | ||||
čiščenje mRNA | Tradicen shem ciscenja | Zasoljevanje z litijev kloridom | 1 | droga mRNA |
Ciscenje z magnetnimi sferami | ||||
Shema ciscenja z hromatografsko kolonom | Kombinacija večih kromatografskih metod | 1-2 | ||
Zamenjava buferja | Ultrafiltracija | 1 | ||
liofilizacija mRNA | Liofilizacija | Predzamrzeljavanje | 2-3 | liofilizirana praščica mRNA |
Prva sušenja (sublimacija) | ||||
Druga sušenja (dezorpcija) | ||||
zapiranje mRNA | Zapoljevanje v LNP | Zapoljevanje v LNP | 2-3 | mRNA-LNP Zdravilni izdelek |
Koncentracija in zamenjava buferja | ||||
analiza kakovosti mRNA | mRNA droga snov / sušena prašna mika | Koncentracija, čistota | 1 | Izpitni poročil |
Celostnost, učinkovitost zakrivanja, porazdelitev repa polyA | 2-5 | |||
mRNA-LNP farmacevtski izdelek | Učinkovitost inkapsulacije | 1 | ||
Velikost delcev in porazdelitev | ||||
Površinska nabojnost | ||||
preverjanje izražanja mRNA | ocena celic 293T | Postavljanje celic | 4 | |
Začasna transfekcija celic | ||||
Opazovanje fluorescenčnega signala | 1-3 | |||
Western blot (WB) / Povezava z enzimi na osnovi antigen-antitela reakcije (ELISA) |
5' Kap |
▪ Nezakapiran ▪ Cap0, skupaj zakapiran ▪ Cap1, skupaj zakapiran ▪ Kap1, enzimatsko zaklepanje |
5' UTR/3' UTR |
▪ Naravna UTR zaporedja ▪ Mutantna/Inženirska UTR zaporedja |
3' PolyA rep |
▪ 100A ~120A rep (priporočeno) ▪ Segmenteerjeni polyA rep ▪ Druga prilagojena repa |
Spremenjene nukleozide |
▪ Neizmenjene baze ▪ Pseudouridin (Ψ) ▪ N1-Metilpseudouridin (N1Ψ) ▪ 5-metilcitozin (m5C) ▪ 5-metiluridin (m5U) ▪ 5-metoksiburidin (5moU) ▪ 2-tioridin (s2U) ▪ 2′-O-metil-U ▪ Druge spremembe |
Integrirani tok storitev
Ponujamo vrsto storitev od načrtovanja zaporedij na začetku do priprave mRNA, kakovostnega nadzora in potrditve izražanja na koncu.
Mednarodno inovativno načrtovanje in optimizacija zaporedij
Stručno načrtovanje in optimizacija zaporedij mRNA omogočata učinkovito izraz mRNA.
Raznovrstne nukleotidne spremembe
Učinkovito povečajo izraz mRNA in zmanjšujejo neželeni imunski odziv mRNA.
Zrelo očiščevalno platformo
S kombinacijo konvencionalnih in samostojno načrtovanih metod očiščevanja se pridobijo vzorci mRNA z visoko čistočnostjo.
Popolna platforma za kakovostno nadzor
Ogromen izbor kontrol kakovosti, ki izpolnjuje zahteve običajnih testov, kot so koncentracija, A260/280 čistočnost in celovitost, ter stroge zahteve po kakovosti, kot je učinkovitost zaklapanja/predel distribucije polyA.
Hitre dostave
Prilagojeni mRNA lahko dostavimo že v 7 dneh, razen v primeru izvorne sinteze zaporedij.