Vse kategorije
ENEN
dizajn mRNA sekvence

dizajn mRNA sekvence

Domov >  IVT RNA  >  Prilagojena sinteza RNA  >  Prilagojena sinteza mRNA  >  dizajn mRNA sekvence

IVT RNA

dizajn mRNA sekvence

Po osnovni domnevi je posrednik RNA (mRNA) most med prenosom genetskega materiala iz DNA v proteine.

mRNA opravlja biološko vlogo s kodiranjem proteinov v živih organizmih, pri čemer sozrelo mRNA pri eukariotskih organizmih sestoji iz pet komponent: 5' Cap (kap struktura), 5' UTR (nekodiran regij), ORF (odprti berljivi okvir), 3' UTR in 3' poliA rep (poliadenilatni rep).

undefined

Podrobnosti storitev
Proces Izbirne storitve Podrobnosti storitev Dobavni rok (dan)
načrtovanje in optimizacija mRNA zaporedij Načrtovanje in optimizacija kodirnih zaporedij

Poravnava CDS sekvence

Optimizacija kodonske CDS sekvence

1
Dizajn in optimizacija nekodirujočih zaporedij

dizajn in optimizacija zaporedja 5' UTR

dizajn in optimizacija zaporedja 3' UTR

dizajn in optimizacija zaporedja polyA

1-2
Prilagodljive možnosti
5' UTR/3' UTR
  • Naravna UTR sekvenca
  • Mutirana/inženirska UTR sekvenca
3' PolyA rep
  • 100A ~120A rep (priporočeno)
  • Segmentiran polyA rep
  • Drugi prilagojeni rep
Splošne strategije za načrtovanje zaporedja mRNA
komponente mRNA Biološke funkcije Strategije optimizacije
5' kapa Varuje mRNA pred degradacijo s strani exonukleaz in deluje skupaj z poliA repom na 3' endi, poliA vezujočim белkom in belkom začetnega prevajanja za zagon prevajanja proteina. Prirodna Cap1 struktura izogiba vzorcevna razpoznavna receptora in tako zmanjša naravno imunsko odziv, kar se lahko doseže z enim korakom kotranskripcijskega kapiranja ali z dvema korakoma enzimatičnega kapiranja [za več informacij glejte enzimatično kapiranje mRNA in kotranskripcijsko kapiranje].
5' UTR 5' UTR se lahko poveže z ribozomi, regulira prevajanje mRNA in vpliva na stabilnost mRNA. Vsebujejo Kozakovske sekvence brez zelo stabilne sekundarne strukture. Priročni UTR-ji visoko izraženih genov so priljubljeni za transkripcijo in vitro (IVT) mRNA, kot so α-globin in β-globin.
CDS Regije kodiranja beljakovin in kodirane sekvence za antigene, cedilke ali druge funkcionalne beljakovine. Optimizacija kodonov poveča stopnjo prevoda, opazimo pa, da določeni neoptimalni kodoni lahko igrajo vlogo v zlaganju beljakovin.
3' UTR Upravljajo prevod mRNA in stabilnost. Priročni UTR-ji visoko izraženih genov so priljubljeni za IVT mRNA, kot so α-globin in β-globin.
3' poliA rep Upravljajo izraz beljakovin in ščitijo kapično strukturo pred razgradnjo. Zahtevana je primerena dolžina (100-150 bp); kodiranje polyA repa na plazmidu transkripske šablone omogoči bolj določeno dolžino polyA repa.
Naše značilnosti
  • Raznolika izbira UTR virov

Večkratni viri visoko izraženih naravnih in spremenjenih UTR knjižnic; zrela strategija spremembe UTR;

  • Avantgardna ekipa za optimizacijo CDS

Sodeluje s profesionalno ekipo AI algoritmov za dokončno optimizacijo kodonov.

  • Enakomerna porazdelitev polyA repov

Dodajanje polyA zaporedij glede na DNA predloge, da se bolj natančno nadzira dolžina mRNA.

  • Raznolike kombinacije optimizacije

Doseži učinkovito ekspresijo mRNA z nizko imunogenostjo.

Studija primerov

Zasnova zaporedja dvojnega poročila mRNA: mCherry-eGFP mRNA

Storitev mRNA Yaohai Bio-Pharma se vedno posodablja s zasnovanim in optimiziranim zaporedjem dvojnega reporterja gena, ki doseže skupno ekspresijo dveh genov.

Z uporabo običajnega transfekcijevega sredstva se mRNA dvojnega gena v zaporedju mCherry-eGFP transficira v 293T celice, in po 48 urah se zaznamenjata dva fluorescenčna signala, mCherry (rdeč) in poudarjen zeleni fluorescenčni-proteин (eGFP) s hkratno ekspresijo, pri čemer je steklena grafika poudarjena v rumeni barvi.

图片

图片

Ekspresija mRNA mCherry-eGFP v 293T celici

Pridobite brezplačno ponudbo

Get in touch