Vse kategorije
ENEN
Oblikovanje zaporedja mRNA

Oblikovanje zaporedja mRNA Slovenija

Domov >  IVT RNA  >  Sinteza RNK po meri  >  Sinteza mRNA po meri  >  Oblikovanje zaporedja mRNA

IVT RNA

Oblikovanje zaporedja mRNA

Po osrednji dogmi je messenger RNA (mRNA) most za prenos genetskega materiala iz DNK na proteine.

mRNA igra biološko vlogo s kodiranjem proteinov in vivo, zrela mRNA v evkariontskih organizmih pa je sestavljena iz petih komponent: 5' Cap (struktura kapice), 5' UTR (nekodirajoče območje), ORF (odprt bralni okvir), 3' UTR in 3' poliA rep (poliadenilatni rep).

undefined

Storitve Podrobnosti
Proces Izbirna storitev Podrobnosti o storitvi Dobavni rok (dan)
Oblikovanje in optimizacija zaporedja mRNA Oblikovanje in optimizacija kodirnih sekvenc

Poravnava zaporedja CDS

Optimizacija CDS kodona

 1
Oblikovanje in optimizacija nekodirajočih zaporedij

Oblikovanje in optimizacija zaporedja 5' UTR

Oblikovanje in optimizacija zaporedja 3' UTR

oblikovanje in optimizacija zaporedja polyA

 1-2
Prilagodljive možnosti
5' UTR/3' UTR
  • Zaporedje Nature UTR
  • Mutant/skonstruirano UTR zaporedje
3' PolyA rep
  • 100A ~120A rep (priporočeno)
  • Segmentiran poliA rep
  • Drugi rep po meri
Skupne strategije za načrtovanje zaporedja mRNA
Komponente mRNA Biološke funkcije Optimizacijske strategije
5' Cap Zaščiti mRNA pred razgradnjo z eksonukleazami in deluje usklajeno s poliA repom na 3' koncu, poliA vezavnim proteinom in proteinom faktorja iniciacije prevajanja, da sproži prevajanje proteina. Naravna struktura Cap1 se izogiba receptorjem za prepoznavanje vzorcev in tako zmanjša naravni imunski odziv, kar je mogoče doseči z enostopenjskim kotranskripcijskim omejevanjem ali dvostopenjskim encimskim omejevanjem [za podrobnosti glejte encimsko omejevanje mRNA in sotranskripcijsko omejevanje].
5' UTR 5' UTR lahko prepoznajo ribosomi, uravnava prevajanje mRNA in vpliva na stabilnost mRNA. Vsebujejo Kozakova zaporedja brez zelo stabilne sekundarne strukture. Za in vitro transkripcijske (IVT) mRNA, kot sta α-globin in β-globin, so prednostni naravni UTR-ji visoko izraženih genov.
CDS Regije, ki kodirajo proteine, in kodirne sekvence za antigene, protitelesa ali druge funkcionalne proteine. Optimizacija kodona poveča stopnjo prevajanja, pri čemer je treba upoštevati, da lahko nekateri neoptimalni kodoni igrajo vlogo pri zvijanju beljakovin.
3' UTR Uravnava prevajanje in stabilnost mRNA. Za IVT mRNA, kot sta α-globin in β-globin, so prednostni naravni UTR-ji visoko izraženih genov.
3' polyA rep Uravnava izražanje beljakovin in ščiti strukturo kapice pred razgradnjo. Zahtevana je ustrezna dolžina (100-150 bp); kodiranje poliA repa na plazmidu transkripcijske predloge zagotavlja bolj definirano dolžino repa poliA.
Naše lastnosti
  • Raznolik izbor virov UTR

Več virov visoko izraženih naravnih in spremenjenih knjižnic UTR; zrela strategija spreminjanja UTR;

  • Vrhunska ekipa za optimizacijo CDS

Sodelujte s strokovno ekipo algoritmov AI, da dokončate optimizacijo kodonov.

  • Enakomerna poliA porazdelitev repa

Za natančnejši nadzor dolžine mRNA dodajte zaporedja poliA glede na predloge DNK.

  • Raznolike kombinacije optimizacije

Doseči učinkovito izražanje mRNA z nizko imunogenostjo.

Študija primera

Zasnova zaporedja dvojne reporterske mRNA: mRNA mCherry-eGFP

Storitev mRNA podjetja Yaohai Bio-Pharma še naprej nadgrajuje z zasnovo in optimizacijo tandemskega zaporedja dvojnega reporterskega gena, ki dosega soizražanje dvojnih genov.

Z uporabo običajnega transfekcijskega reagenta se dvojno gensko tandemsko zaporedje mCherry-eGFP mRNA transfecira v celice 293T in dva fluorescentna signala mCherry (rdeč) in izboljšanega zelenega fluorescentnega proteina (eGFP) se zaznata s hkratno ekspresijo po 48 urah in zloženi graf je označen z rumeno.

图片

图片

Izražanje mRNA mCherry-eGFP v celici 293T

Get Free Quote

Priti v stik