Priprava CircRNA zahteva linearno RNA kot prekurzorski material (prekurzor RNA) za ciklizacijo, kjer je prekurzor RNA običajno pripravljen z uporabo linearizirane plazmidne DNA kot transkripcijske predloge in prepisan in vitro s pomočjo T7 RNA polimeraze.
Visokokakovostna plazmidna DNA je bistvena za in vitro transkripcijo (IVT). Yaohai Bio-Pharma lahko na podlagi zrele storitvene platforme za pripravo plazmidov zagotovi visoko čisto in standardno linearizirano storitev priprave plazmidne DNA (pDNA), da zagotovi celovitost izdelkov IVT.
Storitve Podrobnosti
| Proces |
Izbirna storitev |
Podrobnosti o storitvi |
Dobavni rok (delovnik) |
| Priprava krožnega plazmida |
Genska sinteza |
Genska sinteza (tretja oseba) |
7-10 |
| Plazmidno pomnoževanje |
Plazmidno pomnoževanje |
2 |
| Ekstrakcija plazmidov |
| Linearizirana priprava plazmida |
Linearizacija in čiščenje plazmidov |
Linearizacija plazmidov |
1 |
| Linearizacijsko čiščenje DNK |
| Kontrola kakovosti plazmidne DNA |
Čistost koncentracije |
Ultravijolična (UV) spektrofotometrija |
1-2 |
| Plazmidna konformacija |
Elektroforeza v agaroznem gelu (AGE) |
| Kapilarna elektroforeza (CE) - neobvezno |
| Identifikacija plazmida |
Identifikacija restrikcijskega encima/AGE |
Naše lastnosti
Fleksibilna izbira metod linearizacije
Optimizacija metod ekstrakcije in čiščenja DNK za doseganje visokih stopenj predelave.
Strogi standardi nadzora procesov s stopnjo superhelične konformacije vzorcev plazmidov za raziskave nad 80 %.
Visok standard in visoko učinkovita priprava plazmidov ter storitve nadzora kakovosti za izpolnjevanje eksperimentalnih potreb.
Študija primera
Če za primer vzamemo izdelek mCherry circRNA družbe Yaohai Bio-Pharma, je superzvito razmerje vzorcev plazmidov transkripcijskih predlog (raziskovalna stopnja) več kot 70 %, s stopnjo linearizacije blizu 100 %.
mCherry circRNA pripravimo z lineariziranim plazmidom kot predlogo in transfektiramo v celice 293T. Visoka stopnja izražanja fluorescence (rdeča fluorescenca) je zaznana po 24 urah po transfekciji, ki se bo okrepila po 48 urah in jo je mogoče zaznati še 7. in 14. dan po transfekciji.
Beljakovine mCherry so stabilno in učinkovito izražene, čistost transkripcijske predloge pa lahko izpolni zahtevo za zdravilo circRNA (DP) z visoko kakovostjo.
In vitro validacija izražanja mCherry circRNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
