Pomen izbora številčev
Izbira primernega gostitelja je nujna za razvoj CMC biotehnoloških izdelkov, saj določa kakovost in skladnost izdelka ter proizvodnega procesa. Direktni cilj izbora gostitelja je zagotoviti kandidata za osnovno bančno celico (PCB) z visoko izrazitostjo in visoko stabilnostjo glede na stabilnost pri prenosih in shranjevanju. Izbor primernega gostitelja je potreben iz dveh glavnih razlogov:
- Prvič, da se izbere mikrobiološki gostitelj s visoko stopnjo izražanja. Obstaja več tržnih številčev, ki jih uporabljajo za izražanje različnih vrst beljakovin, kot so toksične beljakovine, rešljive beljakovine ali eukariotske beljakovine.
- Drugi, da se zasloni gostitelj z genetsko stabilnostjo. Testiranje genetske stabilnosti je ključna točka skozi celoten življenjski cikel proizvodnje. Predlagano je, da se visoka genetska stabilnost považa za drugo ključno lastnost pri primerenem štriku.
Ključne besede: izbiro mikrobne vrste, preskusovanje mikrobne vrste, visokoprinski preskus bakterij ali kvasov, preskus visoke proizvodnje vrste, preskus visoko stabilne vrste, preskus genetsko stabilne vrste Vrsta uporabe: človeška medicina, živalska medicina, cepivi, sintetična biologija, rekombinantni veliki molekuli bioloških snovi, biološki srednji
Storitve za preskusovanje štrikov Yaohai Bio-Pharma
Za korist imamo več kot 10 let izkušenj v področju CDMO v mikrobioloških biotehnoloških proizvodih. Podpiramo razvoj in proizvodnjo različnih velikih molekul, vključno s rekombinantnimi subunitskimi cepicami, virusno podobnimi delci (VLP), hormoni (insulin, GLP-1, rastni hormone), citokins (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), rastne faktorje (EGF, FGF, NGF), nanotijele/Single-domain antibodies (sdAbs), enzimi itd.
Nakupili smo bogate izkušnje pri izbiri različnih vrst plazmidnih vektorjev in mikrobioloških gostiteljev, vključno z bakterije. Escherichia coli (E. coli), in kvasinki Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Možemo najti najboljši izražalni sistem za vaše edinstvene biotehnološke proizvode.
Zbrali smo različne mikrobiološke gostitelje z jasnimi izvorji in standardnim CoA, vključno z E.Coli bakterijskim izrazom in kvasnim izrazom.
Podrobnosti storitev
|
Storitve
|
Podrobnosti storitev
|
Najmanjši časovni razpored/dan
|
Rezultati
|
|
Izgradnja štrinke (E. coli)
|
Transformacija plazmida (več gostiteljev)
|
5
|
COA komercialnih gostiteljev Porocilo o izgradnji štrinke
|
|
PCR verifikacija
|
|
Čiščenje štrinke
|
|
Ohranjanje štrinke
|
|
Izgradnja štrinke (kvasarka)
|
Priprava kompetentnih kvasarskih celic
|
10
|
|
Linearnizacija plazmida
|
|
Elektro transformacija
|
|
Testiranje upornosti / hranilske primernosti
|
|
Čiščenje štrinke
|
|
Ohranjanje štrinke
|
|
Testiranje primernega gostitelja
|
Izvleček plazmidne ali genomsko DNA
|
15-20
|
Postopek testiranja gostitelja COA za inženirane štranske
|
|
Verifikacija PCR, restrikcijska endonuklease
|
|
Sekvenciranje ciljnega gena
|
|
Testiranje gostiteljev z visoko izrazitostjo
|
|
Testiranje gostiteljev s genetsko stabilnostjo
|
|
Ohranjanje štrinke
|
Studija primerov
Primeren gostitelj poveča raven proteinske ekspresije 2,5 krat.
Nam je bilo zadolženo, da razvijemo visoko proizvodne E. coli čebeljice. In poskusili smo tri vrste trgovinskih E. coli domačinov, na podlagi lastnosti ciljne proteine. Pokazalo se je, da je čebeljica S1-1 in S1-2 (Slika A: Vzorec 1,2) povečala raven proteina do 3,5-krat več kot začetna čebeljica stranke (Slika A: Vzorec 3).
Prav tako je čebeljica S1-1 prikazala visoko genetsko stabilnost (Slika B), in je bila priznana za kandidatko za osnovno bančenje celic (PCB).
Značilnosti naših storitev
Dokazana strokovnost pri različnih mikrobioloških domačinah, npr., E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink s strain1/2/3/4; S. cerevisiae in H. polymorpha .
Imamo izkušenje z E. coli sekretijo periplazma, razčlenljivo izrazovanje in izrazovanje vključitvenih teles, ter tudi s kmetijsko notranjim ali sekretnim izrazovanjem. Ne dodajemo antibiotikov ali jih dodajamo pod regulativnim nadzorom.
Ustvarimo platformo za visoko stopnjo preskusovanja, da izberemo visoko proizvajajoče in stabilne številke med več kot sto kandidatov.
Zaščitimo, da je postopek inženiringa in preskusovanja številk sledljiv pod Dobrim upravljanjem z podatki in zapisoma.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
