Yaohai Bio-Pharma ponuja storitve testiranja N-terminalne sekvence in analize podatkov na osnovi tehnologije Hidrofilna kromatografija-Masovni spektrometrija (LC-MS) ali metode Edmanovega razgradnjanja, kar vam omogoča določiti aminokisline na ustreznih koncih proteina zanimanja. Analizo N-terminalne modifikacije je mogoče izvesti tudi s pomočjo LC-MS.
Bili smo vpleteni v karakterizacijo strukture proteina različnih velikih molekul, vključno s rekombinantnimi podjediničnimi cepivami, nanotijelami/VHHs/ enodomenskimi tijelom (sdAbs), odlomki tijel, hormoni/peptidi, citokinskega, rastnih faktorjev (GF), enzimov, kolagenov itd.
Uredbeni zahtevi za N terminalno sekveniranje
Po smernicah ICH Q6B je nujno potrditi sekvenco vašega proteina in preučiti konce glede na katere koli možne spremembe.
Metode N terminalnega sekveniranja
Analiza |
Metoda |
N-terminalno sekvenciranje |
Edmanovo razgradnjanje, Hidrofilna kromatografija-Masovni spektrometrija (LC-MS) |
Postopki
LC-MS
1. Fluorescentno označevanje N-konca beljakvice
2. Večkratne degrezacije
3. Analiza s pomočjo LC-MS / Masovna spektrometrija (MS)
Edmanova degradacija
1. Elektroforeza v gelu z Dodecilsulfatom sodika (SDS) za ciljno beljakvino
2. Premik gela na membrano iz polivinil difluorida (PVDF) in barvanje
3. Določite in izrežite ciljni pas beljakvice
4. Edmanovo sekvenciranje N-konca
5. Analiza podatkov