Yaohai Bio-Pharma ponuja testiranje N-terminalne sekvence in storitve analize podatkov na podlagi tekočinske kromatografije-masne spektrometrije (LC-MS) ali Edmanove metode razgradnje, ki vam omogoča določanje aminokislin na ustreznih koncih proteina, ki vas zanima. Modifikacijo N-terminala je mogoče analizirati tudi z LC-MS.
Sodelovali smo pri strukturni karakterizaciji beljakovin različnih velikih molekul, vključno z rekombinantnimi podenotnimi cepivi, nanotelesi/VHH/enodomenskim protitelesom (sdAbs), fragmenti protiteles, hormoni/peptidi, citokini, rastnimi faktorji (GF), encimi, kolageni, itd.
Regulativne zahteve za zaporedje terminalov N
V skladu s smernicami ICH Q6B je treba potrditi zaporedje vaše beljakovine in pregledati konce za morebitne variacije.
N Metode terminalnega zaporedja
Analiza |
Metoda |
N-terminalno sekvenciranje |
Edmanova razgradnja, tekočinska kromatografija-masna spektrometrija (LC-MS) |
Postopki
LC-MS
1. Fluorescentno označevanje N-terminala proteina
2. Več prebav
3. Analiza LC-MS/masne spektrometrije (MS).
Edmanova degradacija
1. Gelska elektroforeza z natrijevim dodecil sulfatom (SDS) vaše ciljne beljakovine
2. Prenos gela na membrane iz poliviniliden fluorida (PVDF) in barvanje
3. Identificirajte in odrežite ciljni proteinski pas
4. Edmanovo sekvenciranje N-konca
5. Analiza podatkov