Deamidacija stranskih veriž glecinina in asparagina je pogosta sprememba v smislu vpliva na lastnosti beljakovinskih bioprevarljenih snovi. Deamidacija se lahko zgoditi tudi pri ostanke glecinina, vendar običajno po mnogo nižji hitrosti. Hitrosti deamidacije so vplivene od temperature, pH, lokalne strukture proteina in sosednjih aminokiselinskih ostankov.
Yaohai BioPharma ponuja storitev testiranja deamidacije aminokiselin, ki vam omogoča zaznavanje deamidacije aminokiselin s pomočjo tekoče kromatografije-masovne spektrometrije (LC-MS).
Bili smo vpleteni v karakterizacijo strukture proteina različnih velikih molekul, vključno s rekombinantnimi podjediničnimi cepi, nanotijelami/VHHs/ enoodmernimi tijeli (sdAbs), odlomki tijel, hormoni/peptidi, citokinske, rastne faktorje (CF), enzimi, kolagene itd.
Uredbena zahtevanja za deamidacijo aminokiselin
Po smernicah ICH Q6B je mogoče deamidirane oblike zaznati in karakterizirati s kromatografskimi, elektroforetičnimi in/ali drugimi relevantnimi analitičnimi metodami.
Analitične metode
| Analiza |
Metode |
| Deamidacija |
Tovorjenje na kapilarni cekini - masovno spektroskopija (LC-MS) |
Postopki
npr., deamidacija asparatske kisline
1. Enzimsko razgradnjo
2. LC-MS v pogoju visoko učinkovite tovorjenje na kapilarni cekini (HPLC)
3. Analiza podatkov
Deamidacija asparagina poteka prek suksinimidnega medproizvoda (Suc), ki je občutljiv na racemizacijo in hidrolizo, kar da četiri izomer Asp, vključno z L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp in D-IsoAsp.
Teoretično bi se lahko deamidacija glutamina pretvorila v štiri odgovarjajoče izomere glutamske kisline skozi postopek podoben deamidaciji asparagina.
Visoko ločljiva masa spektrometrija lahko enostavno določi 1-Da masno razliko med peptidoma s Asn/Gln in njihovimi odgovarjajočimi deaminiranimi protislonki Asp/Glu.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
