Pomen deformacijskega inženiringa
Cilj inženiringa sevov je ustvariti izraznega gostitelja z značilnostmi pričakovanj, kar je potrebno za razvoj CMC bioloških zdravil ter določa kakovost in doslednost izdelka in proizvodnega procesa.
Ključne besede: genetski inženiring in presejanje seva, konstrukcija seva za izražanje beljakovin, inženiring mikrobnih celic, inženiring seva bakterij, inženiring seva kvasovk, konstrukcija prokariontskega mikroorganizma, inženiring evkariontskega mikroorganizma, inženirski sev
Uporaba: humana medicina, medicina za živali, cepiva, sintetična biologija, rekombinantna biološka zdravila z velikimi molekulami, biološki reagent
Storitve inženiringa sevov Yaohai Bio-Pharma
Z več kot 10-letnimi izkušnjami CDMO na področju mikrobnih bioloških zdravil smo si nabrali bogate izkušnje pri načrtovanju in izbiri različnih vrst plazmidnih vektorjev in mikrobnih gostiteljev (bakterij, kvasovk). Najdemo lahko najboljši izrazni sistem za vaša edinstvena biološka zdravila.
Zbrali smo različne mikrobne gostitelje z jasnimi viri in standardnim CoA, vključno z
Bakterije: Escherichia coli (E. coli)
Kvas: Pastirska pichia (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Podrobnosti o storitvi
Storitve
|
Podrobnosti o storitvi
|
Minimalna časovnica/dan
|
Rezultat
|
Strain Engineering
|
Gene knock-out ali genska delecija
|
TBD
|
Poročilo o deformacijskem inženirstvu
|
Gene knock-in ali Gene insertion
|
Strain Konstrukcija (E. coli)
|
Transformacija plazmida (več gostiteljev)
|
5
|
COA komercialnih gostiteljev,
Poročilo o konstrukciji deformacije
|
PCR preverjanje
|
Čiščenje seva
|
Ohranjanje seva
|
Konstrukcija seva (kvas)
|
Priprava kompetentnih celic kvasovk
|
10
|
Linearizacija plazmidov
|
Elektro transformacija
|
Preverjanje odpornosti/prehranske pomanjkljivosti
|
Čiščenje seva
|
Ohranjanje seva
|
Pregled primernega gostitelja
|
Ekstrakcija DNK plazmida ali genoma
|
15-20
|
Postopek preverjanja gostiteljev,
Poročilo o testiranju spremenjenih sevov
|
PCR preverjanje, prebava z restrikcijskimi encimi
|
Sekvenciranje ciljnega gena
|
Preverjanje gostiteljev z visoko ekspresijo
|
Pregled gostiteljev z genetsko stabilnostjo
|
Ohranjanje seva
|
Študija primera
Konstruirana Hansenula polymorpha je izboljšala izkoristek izražanja HPV L1 VLP.
Vzpostavili smo kvas Polymorpha Hansenula (H. polymorpha) inženirska in presejalna platforma za izražanje rekombinantnih proteinov/peptidov. Najprej smo ustvarili H. polymorpha sevov s pomanjkanjem proteaze s ciljno delecijo genov. Drugič, vektor, ki nosi gen HPV L1, je bil preoblikovan v kompetentnega H. polymorpha celica. Nazadnje pregledamo najboljši klon med stotinami možnosti, z genetsko stabilnostjo in visoko produktivnimi lastnostmi.
Naše storitvene značilnosti
Dokazali smo strokovno znanje o različnih mikrobnih gostiteljih, npr. Escherichia coli (E. coli) DH5α, TOP10, Trans10, BL21; pastorska pichia (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink sev 1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) in Polymorpha Hansenula (H. polymorpha).
Imamo izkušnje z E. coli periplazmatsko izločanje, izražanje topnih in inkluzijskih telesc, kot tudi znotrajcelično ali izločanje kvasovk.
Ne dodajamo antibiotikov ali jih dodajamo v skladu z regulativnimi navodili.
Vzpostavimo visoko zmogljivo presejalno platformo za presejanje visoko produktivnih in stabilnih sevov iz več kot sto kandidatnih sevov.
Zagotavljamo, da je proces inženiringa in presejanja sledljiv v okviru dobrega upravljanja podatkov in evidenc.