Produkte, pridobljene s ciklizacijo in vitro in obogatitvijo z RNazo R, je treba nadalje odstraniti iz transkripcije in vitro (IVT), vključno z neporabljenimi substrati v reakciji ciklizacije, reakcijskimi stranskimi produkti in zarezano RNA.
Yaohai Bio-Pharma ima zrelo obarjanje LiCl, čiščenje z magnetnimi kroglicami, samorazvito čiščenje in druge raznolike rešitve za čiščenje za učinkovito odstranjevanje različnih nečistoč in pripravo zelo čiste circRNA.
Čistilna raztopina za majhne količine circRNA za transfekcijo celic in kot del poskusov na živalih.
Čistilna raztopina za majhne količine circRNA za transfekcijo celic in kot del poskusov na živalih.
Scenariji uporabe z višjo kakovostjo;
Stabilen in razširljiv postopek čiščenja za izpolnjevanje proizvodnih zahtev GMP.
Proces | Izbirna storitev | Podrobnosti o storitvi | Dobavni rok (dan) | Rezultat |
čiščenje circRNA | Konvencionalna čistilna raztopina | Obarjanje litijevega klorida | 1 | circRNA zdravilna snov |
Čiščenje z magnetnimi kroglicami | ||||
Visoko čisto čiščenje circRNA | Preparativna tekočinska kromatografija visoke ločljivosti (HPLC) | 1-2 | ||
Izmenjava medpomnilnika | Ultrafiltracija | 1 | ||
nadzor kakovosti circRNA | Koncentracija / čiščenje | Ultravijolična (UV) spektrofotometrija | 0.5 | Testno poročilo |
Čistost | Elektroforeza v agaroznem gelu (AGE)/E-gel | |||
HPLC-izbirno | 1 |
Doseči je mogoče scenarije uporabe.
circRNA s čistostjo več kot 90 %;
S strogim nadzorom RNaz v eksperimentalnem okolju in potrošnem materialu je razgradnja RNK učinkovito preprečena.
Yaohai Bio-Pharma je vzpostavil zrelo raztopino za čiščenje circRNA, ki lahko učinkovito odstrani različne nečistoče, povezane s procesom.
Produkti krožne RNA, prečiščeni s konvencionalno raztopino, so še vedno očitno pomešani z zarezano RNA in introni.
Po čistilni raztopini, ki jo je razvil Yaohai Bio-Pharma, je mogoče uspešno odstraniti različne nečistoče linearne RNA, kot so zarezana RNA in introni.
Validacija izražanja circRNA
Z uporabo običajnega liposoma se prečiščena eGFP circRNA transfektira v celice 293T in fluorescenčni signal opazimo po 24 urah in se še naprej krepi po 48 urah. Fluorescenčni signal je še vedno mogoče zaznati 7. in 14. dan po transfekciji.