Produkti, pridobljeni s kikličnim procesom in bogastjem RNase R, zahtevajo še dodatno odstranitev iz tranzkripcije v laboratoriju (IVT), vsebine neuporabljenih substratov v kiklični reakciji, reakcijskih stranskih produktov in oškrbljene RNA.
Yaohai Bio-Pharma ima zrele rešitve za LiCl sedimentacijo, magnetne čestičke za počistitev, samodevne metode počistitve in druge raznovrste metode počistitve, ki učinkovito odstranjujejo različne onesnaževalce in pripravijo visokočisto cirkulacijsko RNA.
Počistitvena rešitev za majhne količine cirkulacijske RNA za transfekcijo celic in kot del živalskih poskusov.
Rešitev za čiščenje malih količin circRNA za transfekcijo celic in kot del živalskih poskusov.
Uporabni scenariji z višjo kakovostjo;
Stabilen in skalabilen postopek čiščenja, da se izpolnijo zahtevke GMP proizvodnje.
Proces | Izbirne storitve | Podrobnosti storitev | Dobavni rok (dan) | Rezultati |
čiščenje circRNA | Konvencionalna rešitev očiščevanja | Zasoljevanje z litijev kloridom | 1 | snov drugega krožnega RNA |
Ciscenje z magnetnimi sferami | ||||
Zelo čisto očiščevanje circRNA | Pripravno visokotiskovno tekočinsko kromatografijo (HPLC) | 1-2 | ||
Zamenjava buferja | Ultrafiltracija | 1 | ||
krmiljenje kakovosti krožnega RNA | Koncentracija\/počiščanje | Ultravijolična (UV) spektrofotometrija | 0.5 | Izpitni poročil |
Čistota | Elektroforeza v agarovem gelu (AGE)/E-Gel | |||
HPLC - izbirno | 1 |
Uporabni scenariji se lahko dosežijo.
circRNA z čistoščino večjo od 90%;
Z strogo kontrolo RNasov v poskusni okolju in potrošnini učinkovito preprečujemo degradacijo RNA.
Yaohai Bio-Pharma je vzpostavila zrelo rešitev za počiščevanje circRNA, ki učinkovito odstrani različne procesne nečistote.
Krožna RNA, počiščena s standardno rešitvijo, je še vedno očitno mešana s preraženo RNA in introni.
Po uporabi rešitve za počiščevanje, razvite s strani Yaohai Bio-Pharma, se lahko uspešno odstranijo različne linearno RNA nečistote, kot so preražene RNA in introni.
potrditev izražanja circRNA
Z uporabo običajne liposome se purificirana eGFP circRNA transfekcija izvede v 293T celice, in po 24 urah se opazi fluorescenčni signal, ki se nadaljuje in še poveča po 48 urah. Fluorescenčni signal je še vedno zaznamljiv na sedmem in četrtem danu po transfekciji.