Proteaza za odstranitev oznake
Za izboljšanje raztopljivosti in poenostavitev procesa očiščevanja rekombinantnih beljakovin so raziskovalci običajno dodali fuzijske oznake, med katerimi so His-oznaka, maltazna vezujoči beljak (MBP) in glutatjon-S-transferaza (GST) pogosto uporabljene.
Obznačena kot dodatna sekvence beljakovine jo je potrebno odstraniti, da bi se ohranila biološka aktivnost v farmacevtski industriji. Odstranitev fuzijskih oznak zahteva lokacijsko specifične proteaze, kot so enterokinaza (EK), trombin, proteaza tabakačne črte (TEVp), človeška rinovirska proteaza 3C (HRV3C), mala ubikvitna spremenljiva beljakova (SUMO) proteaza, proteaza tabakačne žilčaste mramorne virusa (TVMV) in karboksipeptidaza A/B (CPA/CPB).
|
Vrsta
|
Enzim
|
Prepoznavni lokacija
|
|
Endoproteaze za odstranitev oznak
|
Enterokinaza (EK), enteropeptidaza
|
DDDDK↓
|
|
Trombin
|
LVPR↓GS
|
|
TEV proteaza
|
ENLYFQ↓G
|
|
HRV3C proteaza
|
LEVLFQ↓GP
|
|
SUMO proteaza
|
Tretirska struktura SUMO
|
|
Proteaza TVMV
|
ETVRFQG↓S
|
|
Ekoproteaze za odstranitev oznake
|
Karboxipeptidaza A (CPA)
|
C-končne aminokisline, razen Pro, Lys in Arg
|
|
Karboxipeptidaza B (CPB)
|
C-končni Lys in Arg
|
Drugi proteazi
|
Uporaba
|
Enzim
|
Funkcija
|
|
Drugi proteazi
|
Proteaza K
|
Serinska proteaza, ki razgrdne proteine s hidroliziranjem peptidskih vez.
|
|
IdeS, IgG proteaza
|
Enzimi, ki razgradijo IgG (Ides), ki sesekajo na določenem mestu imunoglobulina G (IgG), s katerim nastanejo fragmenti Fab in Fc.
|
|
IgA1 proteaza
|
Proteolitični enzim, ki razcepa določeno mesto v zaporedju hrbtenice človeškega imunoglobulina A1 (IgA1).
|
Nukleaza
|
Uporaba
|
Enzim
|
Funkcija
|
|
Nukleaza
|
Nukleaza
|
Seče nukleinske kisline (DNA ali RNA) s hidroliziranjem fosfatdiesterovih vezi.
|
|
Omejitevni enzim
|
Endonukleaza, ki seče DNA na ali blizu določenih lokacij.
|
Amidaza
|
Uporaba
|
Enzim
|
Funkcija
|
|
Amidaza
|
PNGase F
|
Razcepa med najbolj notranjim GlcNAc in asparaginovimi ostanki visoko mannozne, hibridne in kompleksne oligosacharidnih verig.
|
Yaohai Bio-Pharma ponuja kompleksen CDMO rešitev za enzymatične reagenče
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
