nterferon-β (IFN-β) nterferon-γ (IFN-γ)
אנזימים תרפיים שמשתמשים בתהליכים ביוטכנולוגיים נמצאים בשימוש רחב עבור מספר יישומים קליניים, כולל תרפיה להחלפת אנזים, התפרקות של מטבוליטים או רעלים מצטברים, טיפול בסרטן והערכה גנטית. מספר אנזימים תרפיים יכולים להיבנות במערכת ביטוי מיקרוביאלית.
שימוש |
אנזימים |
חומר |
מוצרים/דרכים טיפוסיות |
תרפיה להחלפת אנזים |
אדנוזין או דאוקסיאדנוזין |
Elapegademase-lvlr (Revcovi) |
|
פניללנין |
פיגוואלייס-פוקז (פאליינזק) |
||
פירוק של מטבוליטים שצברו |
חומצה אורית |
פיגליטיקאס (קריסטקסה) רסבוריקאס (פאסטורטק) |
|
קולגנאז |
קולגן 'תסיסה' |
קולגנאז קלוידריום היסטוליטיקום (סיאפלקס, קיו, סנטיל) |
|
קולגן, פיברונקטין ולמינין |
אוקריפלסמין (ג'טרא) |
||
פלאזמינוגן |
רטפלס (רטאבס) |
||
אימונוגלובולין G (IgG) |
אימליפידאז (אידפריקס) |
||
אימונוגלובולין A (IgA) |
PKU308/AP308IGAN פראוטזת IgA |
||
פירוק טוקסינים |
מתוטריאט |
גלוקארפידאז (Voraxaze) |
|
טיפול בסרטן |
אספרגין |
אספרגינאז (Elspar) קלספארגז פגול-מfcn (Asparlas) |
|
עריכה גנומית |
גן מטרה |
אקסאגמגלוגן אוטוטמסל (Exa-cel, CTX001) |
יש מספר חומרים תזונתיים המשמשים בייצור RNA ארוך (למשל, mRNA, saRNA, circRNA), בייצור תרכובות אנטיבדיה-תרופות (ADCs) ואחרים. חומרים תזונתיים מיוצרים מיקרוביאליים הם יותר כלכליים מאשר תאים של יונקים, במיוחד מערכת ביטוי של E. coli.
שימוש |
אנזימים |
פונקציה |
חומרים תזונתיים עבור ייצור RNA לינארי, ללא RNase |
אנזימי הגבלה |
הופעת DNA פלסמידי (pDNA) לצורה לינארית כדי להימנע מהצגת טרנסקריפט ארוך יותר. |
פולימראז T7 RNA (T7 RNAP) |
להתאגד עם המופע T7 ולהפיק טרנסקריפט RNA ספציפי; שחקן תפקיד מפתח במהלך תגובה של טרנסקريبציה חוץ גנום (IVT). |
|
חומר תזונתי Vaccinia |
הוספת מבנה Cap לקצוות 5′ של mRNA שנוצר באמצעות IVT. |
|
פירופוספטטאז, אורגנית (iPPase) |
למנוע את הפירופוספט במהלך תגובה של IVT. |
|
מונע RNase, רקורסנטי |
לכבות פעילות של RNase במהלך תגובת IVT. |
|
DNase I |
להסיר את המודל ה-DNA. |
|
אנזים לייצור circRNA, חסר RNase |
Rnase R |
לפרק RNA ליניארי ולע关于我们icher RNA מעגלי. |
קשר גליקן מוסדר על ידי אנזים |
PEAT-N-גליקוזידאז (PNGase F) |
חותך את הקשר האמיד בין הסוכר הראשון GlcNAc והשרשרת הצדדית Asn297; שחרור גליקנים מאנטיבדיס IgG. |
טרנסגלאטמינאז בקטריאלית (BTG) |
לקשור משאבים בצורה מדויקת כדי ליצור ADCs. |
|
Sortase A |
מזרזים את חיבור הפרוטאינים. |
|
β1,4-גלקטוזידאז |
שחרר כל גלקטוזות סופיות ויצר את איזומר G0 הומוגני של האנטיבודי. |
|
β1,4-גלקטוזילטרנספרז (Gal-T) |
מעביר שארית סוכר עם קבוצת פונקציונלית ריאקטיבית כימית. |
|
α2,6-סיאילטרנספרז (Sial T) |
הכלה של שאריות חומצה סיאיל סופיות בתוך המבנה הגליקאני של האנטיבודי המקורי. |
|
שיפוץ גליקנים תחת פעולת אנזימים והנדסת גליקו |
אנדו-N-אצטילגלוקוסאמינידאז (ENGase) |
הפרדת הקשר הגליקוזידי β1,4 בין GlcNAcβ1–4GlcNAc של N-גליקנים; הסרת גליקנים מ-N הקשורים לאזור Fc של אנטיבדים IgG. |
אנדוגליקוזידאז S (EndoS) |
||
ג'ליקוזילטרנספרזות (GTs) |
העברבורה של N-גליקן ל-IgGs ללא fucose. |
|
אחרים |
אנזימים מיוצרים על ידי זן מיקרוביאלי |
צורך מותאם אישית |
תגים מושרים נמצאים בשימוש כדי לשפר את התחלפותיותם והיציבות של חלבונים רקורסנטיים מעניינים ולעשות אותם קלים יותר לפירוק. התגים השכיחים כוללים His-tag, חלבון שורש maltose (MBP), glutathione-s-transferase (GST) וכו'.
בדרך כלל, סדרת קישור מוסיפה בין תג הפוזה והסידרה של חלבון המטרה כדי להסיר את התג. הסרת תגי הפוזה דורשת פראזות אתר-סוֹרֶט, כמו אנטרוקינאז (EK), טרוםבין, פראזת נגיף הטבק (TEVp), פראזת נגיף הרינובירוס האנושי 3C (HRV3C), פראזת חלבון SUMO, פראזת נגיף הקמטים של הטבק (TVMV) וקרבוקסיפפטידז A/B (CPA/CPB).
סוּג |
אנזימים |
אתר ההכרה |
פראזות אנדופפטידטיות להסרת תגים |
אנטרוקינאז (EK), אנטרופפטידאז |
DDDDK↓ |
טרומבין |
LVPR↓GS |
|
פראזת TEV |
ENLYFQ↓G |
|
פראזת HRV3C |
LEVLFQ↓GP |
|
פרוטאזת SUMO |
מבנה תלת-מימדי של SUMO |
|
פרוטאזת TVMV |
ETVRFQG↓S |
|
אקסופרוטאזות להסרת תג |
קרבוקסיפפטידז A (CPA) |
חומצות אמינו בקצה C, חוץ מ-Pro, Lys ו-Arg |
קרבוקסיפפטידז B (CPB) |
Lys ו-Arg בקצה C |
שימוש |
אנזימים |
פונקציה |
פרוטאזות אחרות |
פרוטאזה K |
פרוטאזה בסרין שמסתכלת על חלבונים בהידרוליזה של קשרים פפטידיים. |
IdeS, פרוטאזה IgG |
אנזימים המลายים IgG (Ides) שמחלקים בנקודה ספציפית של אימונוגלובולין G (IgG), יוצרים את השברים Fab ו-Fc |
|
פרוטאזה IgA1 |
אנזים פרוטוליטי שמחלק נקודת מיקום ספציפית בסדרת ההinge של האימונוגלובולין A1 האנושי (IgA1). |
|
נוקלאז |
נוקלאז |
מחלק חומצות גרעיניות (DNA או RNA) בהידרוליזה של הקשרים הפוספודיאסטריים. |
אנזים מגביל |
אנדונוקלאז שחותכת את ה-DNA בקרוב או באתר ספציפי. |
|
אמידאז |
PNGase F |
חותכת בין גלוקוזמין N-אצטיל הפנימי ביותר (GlcNAc) למשקעים אספרטין של אוליגוסכרידים מורכבים, היברידיים ועשירי מנה. |
[1] הניגן ג'N, לינץ' מ'D. ההיבט העבר, הווה ועתיד של תרפיות מבוססות על חומצות. Drug Discov Today. 2022 ינו';27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.