אנזימים מרכזיים לייצור ארוך-RNA
mRNA, כסוג של RNA מקודד ארוך, בוצע בצורה בטוחה ויעילה במגוון רחב יותר של אנשים במהלך COVID-19. RNAs אחרים המקודדים ארוכות, כמו RNA מגביר עצמי (saRNA) ו-mRNA מעגלי (circRNA) הראו יעילות גם במחקרים פרה-קליניים וקליניים.
ייצור בקנה מידה גדול של RNA מקודד ארוך מסתמך על שעתוק במבחנה (IVT) על ידי מספר תגובות אנזימטיות. השלבים של ייצור RNA כוללים הכנת תבנית DNA, סינתזת IVT RNA, מחזור הדם, הסרת DNA, שינוי RNA (מכסה וזנב) וטיהור RNA.
ישנם מספר אנזימים מרכזיים המשמשים בייצור RNA מקודד ארוך (למשל, mRNA, saRNA ו- circRNA), כולל אנדונוקלאזות הגבלה, T7 RNA פולימראז (T7 RNAP), מעכב RNase, pyrophosphatase אנאורגני, DNase I, אנזים המכסה של vaccinia ו-RNase R.
התַהֲלִיך
|
אנזים
|
פונקציה
|
הכנת תבנית DNA
|
אנדונוקליזות הגבלה
|
לינאריזציה של DNA פלסמיד (pDNA) כדי למנוע יצירת תמלול ארוך יותר.
|
סינתזה של IVT RNA
|
T7 RNA פולימראז (T7 RNAP)
|
נקשרים למקדם T7 ויוצרים תמליל RNA ספציפי; לשחק תפקיד מפתח במהלך תגובת IVT.
|
מעכב RNase, רקומביננטי
|
מעכב פעילות RNase במהלך תגובת IVT.
|
Pyrophosphatase, אנאורגני (iPPase)
|
מניעת פירופוספט במהלך תגובת IVT.
|
הסרת DNA
|
DNase I
|
הסר את תבנית ה-DNA.
|
שינוי RNA
|
אנזים מכסת Vaccinia
|
הוסף מבני Cap1 לקצוות 5′ של IVT mRNA.
|
2'-O-Methyltransferas
|
העשרת circRNA
|
RNase R
|
לעכל RNA ליניארי ולהעשיר RNA מעגלי.
|
Yaohai Bio-Pharma מציעה פתרון CDMO חד פעמי לאנזימים