כל הקטגוריות
סינתזת saRNA מותאמת אישית

סינתזת saRNA מותאמת אישית

mRNA מגביר עצמי (saRNA), הידוע גם בשם רפליקון RNA, מקודד לרצפי mRNA לתעתוק מבחנה (IVT) וגנים משוכפלים ויראליים שמקורם בנגיפים אלפא או flavivirus. גנים משוכפלים ויראליים מאפשרים הגברה עצמית של ה-mRNA, מה שגורם לביטוי חלבון מוגבר ולמינון מינימלי נדרש של RNA בהשוואה ל-mRNA שאינם מגבירים. היבט נוסף הוא ש-saRNA היא מולקולה גדולה יחסית (יותר מ-14 קילובייט).

Yaohai Bio-Pharma הקימה קבוצה של טכנולוגיות סינתזת mRNA כדי לספק mRNA שאינו מגביר ו-mRNA מגביר עצמי (1000 nt~14000 nt), כגון עיצוב ואופטימיזציה של רצף, IVT, טיהור, ליאופיליזציה וכוסות ננו-חלקיקי שומנים (LNP) . כל המוצרים משוחררים תחת תקני בקרת איכות מחמירים.

איור 1 תכונות מבניות של mRNA IVT: mRNA קונבנציונלי, מעגלי ומגביר עצמי.

תכונות רצף של mRNA מגביר עצמי

ה-RNA המגביר את עצמו מורכב מארבעה חלבונים שאינם מבניים (המוגדרים כ-nsP1, nsP2, nsP3 ו-nsP4), שמקורם בנגיפים אלפא, וירוס ה-Venzuelan Equine Encephalitis (VEEV). בין אלה, nsP1 מציג פעילויות אנזימטיות כפולות, כלומר GTase ו-N7MTase, בעוד של-nsP2 יש פעילות RTPase, חיונית לכיסוי ה-IVT mRNA ליצירת מבנה Cap 0. בנוסף, nsP2 משמש כפרוטאז והליקאז, מה שמקל על העיבוד המורכב של קומפלקס ה-nsP כולו. התפקוד המדויק של nsP3 נותר חמקמק, אך הוא עוסק באינטראקציות עם חלבוני תאי מארח מגוונים, ובכך תורם להחלשת התגובה האנטי-ויראלית המופעלת על ידי המארח.

אזור מקדם תת-גנומי של אלפא וירוס (SGP) ממוקם לפני הגן המעניין (GOI). אלמנט SGP מקל על התחלת שעתוק GOI על ידי עקיפת קריאת הרצף המקודד לחלבוני nsP ויראליים. 

איור 2 סינתזה ומבחני תאים של eGFP saRNA של Yaohai Bio-Pharma RNASci Platform. 

פתרונות מותאמים אישית של saRNA

פרוטוקול הסינתזה של saRNA דומה ל-mRNA: סינתזת mRNA מותאמת אישית

  • עיצוב רצף
  • הכנת תבנית פלסמיד
  • תמלול במבחנה (IVT)
  • מכסה אנזימטי של mRNA
  • מכסת התעתוק משותף של mRNA
  • טיהור mRNA
  • ליאופיליזציה של mRNA
  • Encapsulation LNP
  • ניתוח ובדיקה

קבל הצעת מחיר חינם

נהיה בקשר