עמוד הבית > IVT RNA > סינתזת RNA מותאמת אישית > סינתזת mRNA מותאמת אישית > מכסה אנזימטי של mRNA
כיסוי קצה 5' הוא שינוי חיוני של mRNA. mRNAs עם מבני כובע, במיוחד מבני Cap1, מקלים על mRNA לחמוק מתגובות חיסון מולדות in vivo, וכתוצאה מכך תרגום חלבון יעיל.
מכסה אנזימטי (שיטת שני השלבים) היא השיטה המקובלת של מכסת mRNA, בדומה לתהליך המכסה באורגניזמים אוקריוטיים. תחת פעולתם של סדרה של אנזימים, 7-methylguanine (m7G) מקושר לקצה 5' של mRNA דרך קשר טריפוספט 5'-5' ועובר שינוי מתילציה ליצירת מבנה ה-cap Cap 1 (m7GpppN).
תרשים של היווצרות מבנה כובע טבעי
זרימת תגובת המכסה האנזימטית היא כדלקמן:
DNA פלסמיד ליניארי משמש כתבנית לשעתוק חוץ גופית (IVT) בנוכחות T7 פולימראז, ו-mRNA עם מבנה קצה 5' נוצר לאחר טיהור חד-שלבי באמצעות אנזים המכסה vaccinia ו-2'-O -מתילטרנספראז.
שירות אופציונלי | פרטי השירות | תקופת אספקה (יום) |
מכסה אנזימטי של mRNA | תגובת מכסה אנזימטית | 1 |
אופטימיזציה של תגובת מכסה - אופציונלי | עיצוב ואופטימיזציה של רכיבי תגובה | 3 ~ 7 |
רכיב תגובת המכסה עובר אופטימיזציה, והייצור של תמליל mRNA גדל מאוד.
ה-mRNA המכוסה מועבר לתאי 293T, וניתן לזהות את הביטוי של חלבון המטרה.
באמצעות בקרה קפדנית של סביבת הניסוי של RNaseson וחומרים מתכלים, נמנעת ביעילות פירוק mRNA.
פלטפורמת ה-mRNA של Yaohai Bio-Pharma בנתה תהליך תגובת כיסוי מושלם.
עבור eGFP mRNA, מוצר מקדים של mRNA שהוכן על ידי מכסה אנזימטית, ניתן לראות אות קרינה eGFP (קרינה ירוקה) ברמה גבוהה לאחר העברת תאי 293T במשך 24 שעות, אשר מזוהה על ידי Western Blot (WB), המדגים כי חלבון מטרה משופר חלבון פלואורסצנטי ירוק (eGFP) יכול לבוא לידי ביטוי ביעילות במבחנה.
ביטוי של mRNA eGFP אנזימטי בתא 293T
Yaohai Bio-Pharma התמקדה בפתרונות CRDMO מיקרוביאליים במשך 14 שנים. אנו מספקים שירותי ביולוגיים נקודתיים ללקוחות ברחבי העולם.
No. 801, Jiankang Avenue, Taizhou, Jiangsu, China
זכויות יוצרים © Yaohai Biopharmaceutical Co., Ltd. כל הזכויות שמורות | מדיניות הפרטיות
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
לא
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN