כל הקטגוריות
ENEN
מבחני כוח מבוססי תאים

מבחני כוח מבוססי תאים

עמוד הבית >  IVT RNA  >  ניתוח ובדיקה של mRNA  >  מבחני כוח מבוססי תאים

IVT RNA

מבחני כוח מבוססי תאים

המשמעות של מבחן עוצמת ה-mRNA

עם ההתפתחות המהירה של חיסוני mRNA וטיפולים, יש צורך בפאנל ספציפי של שיטות ניתוח לבדיקת העוצמה (הגדרת פעילותם הביולוגית), הכוללת את יעילות התרגום של mRNA. שיטות אלה מבוססות בדרך כלל על טרנספקציה של תאים ומבחנים תפקודיים של חלבון המטרה.

Yaohai Bio-Pharma מציעה מבחני עוצמה מבוססי תאים לחומרי תרופות מסוג mRNA או מוצרי LNP, כולל טרנספקציה של תאים (תאי 293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 וכו') ומבחני ELISA או Western Blotting (WB).

דרישות רגולטוריות עבור מבחני עוצמה

על פי השיקולים הרגולטוריים של ארגון הבריאות העולמי, "יש לקבוע את העוצמה של כל מנה של החיסון הסופי תוך שימוש בשיטות פונקציונליות כמותיות ומאומתות. מבחני כוח פוטנציאליים במבחנה עשויים לכלול מערכות טרנספקציה מבוססות תאים או מבחני נטולי תאים." וה-USP המליץ ​​על "בדיקה מבוססת תאים" כדי לבדוק את עוצמת ה-mRNA, כלומר ביטוי של חלבון המטרה.

שיטה אנליטית

אָנָלִיזָה

שיטות

מבחני עוצמה

טרנספקציה מבוססת תאים וחלבון מטרה מזהים:

תאי 293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 וכו'.
נוהל

שלב 1. טרנספקציה מבוססת תאים עם mRNA או mRNA-LNP

התאים עוברים תרבית ומועברים ב-mRNA או mRNA-LNP. בפירוט, mRNA עובר transfected לאחר ערבוב עם מגיב טרנספקציה, בעוד mRNA-LNP עובר ישירות לתוך התאים. לאחר 24-48 שעות, יש להבהיר את הסופרנטנט המכיל את החלבון המובע באמצעות צנטריפוגה.

שלב 2. מבחני פונקציונליות של חלבון המטרה

בצע מבחני ELISA או WB כדי להעריך את הקישור הפונקציונלי של חלבוני המטרה.

מקרה מבחן

מבחני כוח מבוססי תאים של דגימות mRNA

Yaohai-BioPharma פיתחה שיטת בדיקת עוצמה מבוססת תאים עבור mRNA, הכוללת תרבית תאים, טרנספקציה של תאים ומבחנים תפקודיים של חלבון. העברנו eGFP mRNA, mCherry mRNA, luciferase mRNA, spike protein mRNA לתאי 293T, וזיהינו חלבון מטרה באמצעות פלואורסצנטי, אות זוהר או צבעוני, WB, ELISA.

5

מבחני כוח מבוססי תאים של מוצרי mRNA מאת Yaohai Bio-Pharma

קבל הצעת מחיר חינם

נהיה בקשר