דף הבית > RNA ITV > סינתזה מותאמת של RNA > סינתזה מותאמת של mRNA > הרכבה חוץ-גופית, IVT
בנוגע לייצור המוני של mRNA, העתקה בתאי תרבית (IVT) היא שיטה יעילה יותר ובוגרת. התגובה של IVT משתמשת בדנ"א פלזמידי מוצק המכיל את המופעל T7 כתבנית, ומRNA נוצר עם טריפוספטטים של נוקלאוטידים (NTPs) כחומר גלם בהשתתפות פולימראז RNA מסוג T7.
השנה של נוקלאוטידים היא פריצת דרך בהשוואת mRNA, שבה מולקולות mRNA לא מודifikasiות זוהות על ידי חיישני RNA תוך תאיים כדי להפעיל את החסינות הטבעית. עבור התחשבויות בקשר לחסינות in vivo של mRNA ויעילות ההתרגם, בדרך כלל התהליך של IVT משתמש בנוכלים מודיפקסיים מסוימים, והנוקלאוטידים המודיפקסיים השכיחים הם פסודו-אורידין (Ψ), N1-מetyl-פסודו-אורידין (N1Ψ) ו-5-methylcytosine (5mC).
דיאגרמת תגובה של טרנסקריפציה חוץ גוף (IVT)
שירות אופציונלית |
פרטי שירות |
תקופת מסירה (יום עבודה) |
טרנסקריפציה חוץ גוף (IVT) |
IVT, טרנסקריפציה חוץ גוף | 1 |
| שינויים של נוקלאוטידים (Ψ/N1Ψ/5mC, וכו') | ||
| הסרת תבנית DNA (DNase I) | ||
השגת התנאים של IVT - אופציונלי |
עיצוב והופעה של רכיבי התגובה | 2-5 |
השתפרת יציבות mRNA והבעת חלבון ב-vivo.
előהכנה של שברים mRNA עד 10kb ניתן להשיג.
באמצעות הופעת תנאים של התגובה, שיעור ההקלדה מגיע עד ל-1:200.
שליטה חמורה ברנאז' דרך סביבת ניסוי וכלי חד פעמיים יכולה למנוע בצורה יעילה את פירוק mRNA.
המערכת הנוכחית של תגובה IVT מותאמת בערך למערכות סינתטיות באורך של כ-100 נוקליאוטיד, ולא למ-RNAים באורך שרירותי.UNCH מחמיר יותר הוא רצף mRNA, כך קשה יותר להעתיק אותו והינו חשוף יותר לפירוק.
כדי להכין רצפים של mRNA מותאמים באורך של כ-10 ק"ב, Yaohai Bio-Pharma הצליחה להכין דגימות באיכותה גבוהה עם יחס העתקה גבוה של 1:135 וקיבלה 135 מיקרוגרם של מוצרים של mRNA שנענו באופן/Dk תחילה לאחר שהועתקו חוץ-גופית באמצעות תכנון ניסיוני מדויק, אופטימיזציה מתמדת של תנאי התגובה והשליטה הדוקה של RNase.
זיהוי mRNA (אלקטרופורזה בגליל אגרוז)
Yaohai Bio-Pharma התמקדה בפתרונות פתרונות CRDMO מיקרוביולוגיים במשך 14 שנים. אנו מספקים שירותים של ביולוגיים משלבים אחד ללקוחות ברחבי העולם.
No. 801, Jiankang Avenue, Taizhou, Jiangsu, China
Copyright © Yaohai Biopharmaceutical Co., Ltd. All Rights Reserved | מדיניותICY
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN