mRNA נמצא בשימוש נרחב במחקר על תפקוד גנים או חלבונים.emás, הוא נפוץ לפיתוח ביולוגיים תרופתיים ומנגינתיים. כסטרטגיה נפוצה להרכבת מולקולות RNA, הטרנסקריפציה החיצונית (IVT) מאפשרת לנו לקבל טרנסקריפטים מותאמים בצורה יעילה.
Yaohai Bio-Pharma הקימה סדרה של טכנולוגיות להרכבת mRNA כדי לספק RNA באיכות גבוהה, כמו תכנון ואופטימיזציה של סדרה, IVT, טיהור, ליופיליזציה והכלאה בננו חלקיקי שומן (LNP). כל המוצרים משוחררים תחת תקנות איכות קפדניות (QC).
עם התפרצות מגיפת הקורונה 19 ב-2020, טכנולוגיית mRNA התקדמה בקופצים וקופצים, והמחקר והיישומים הקשורים לה קיבלו פיתוח לא מוקדם לו, כולל חיסונים אגריים למניעת מחלות זיהומיות, חיסונים תרפיים לטיפול בסרטן, תרופות לטיפול בטומורים, תרפיה להחלפת חלבונים, רפואה רגנראטיבית ותרפיה תאית וגנטית (CGT).
חיסון mRNA | תרפיות mRNA |
|
תַהֲלִיך | שירות אופציונלית | פרטי שירות | תקופת מסירה (יום עבודה) | מוצר סופי |
עיצוב ותאמה של סדרת mRNA | עיצוב ותאמה של סדרות קידודיות | עיצוב סדרת CDS ותאמה של קודונים | 1-3 | קובץ סדר |
עיצוב ותיכנון של סדרות לא-קודדות | עיצוב ותיכנון של UTR, סדרות polyA | |||
הכנה של תבנית טרנסקריפציה פלסמידית | הכנה של פלסמיד רקורסנטי | סינתזה גנונית | 7-10 | |
הגדלה והוצאת פלסמיד | 4 | |||
ליניאריזציה וטהרה של פלסמיד | ||||
טרנסקריפציה חוץ-גופית של mRNA | סגירה קוא-טרנסקריפציונית (שיטה בצעד אחד) | תעתוע תאי (IVT) \ אנלוג קפ | 1-2 | N/A |
השתנות נוקלאוטידים (השתנות UTP\CTP) | ||||
הסרת תבנית DNA (DNase I) | ||||
סימון אנזימטי (תהליך בשני שלבים) | IVT | 2-3 | ||
השתנות נוקלאוטידים (השתנות UTP\CTP) | ||||
הסרת תבנית DNA (DNase I) | ||||
טיהור mRNA (ליתיום כלוריד \ כדוריות מגנטיות) | ||||
סימון אנזימטי | ||||
טיהור mRNA | スキמה טיפוסית לטיהור | השחתת ליתيوم כלוריד | 1 | חומר פעיל של mRNA |
הפרדת כדוריות מגנטיות | ||||
スキמה של טיהור עמוד כרומטוגרפיה | שילובשילוב של מספר שיטות כרומטוגרפיה | 1-2 | ||
החלפת בופר | אולטרה פילטרציה | 1 | ||
ליפוביזציה של mRNA | ליאופיליזציה | קפיאה מוקדמת | 2-3 | אבקת ליאופיליזציה של mRNA |
יובש ראשוני (סובליימציה) | ||||
יובש שניוני (דיסורבציה) | ||||
מיכוש mRNA | הכפפת LNP | הכפפת LNP | 2-3 | מוצר תרופתי mRNA-LNP |
ריכוז וחליפת מקלחת | ||||
ניתוח איכות mRNA | חומר תרופתי mRNA / אבקה ליופייליזד | ריכוז, טהרה | 1 | דוח בדיקה |
שלמות, יעילות כובע, התפלגות זנב polyA | 2-5 | |||
מוצר תרופתי mRNA-LNP | יעילות אינקפסולציה | 1 | ||
גודל חלקיקים וההתפלגות | ||||
מטען פני | ||||
אימות ביטוי mRNA | הערכה של תאים 293T | הצבת תאים | 4 | |
טרנספקציה זמנית של תאים | ||||
צפייה בסימן פלורסנטי | 1-3 | |||
בלוט מערבי (WB) / אסאי קשור חלבון (ELISA) |
כובע 5' |
▪ ללא כובע ▪ Cap0, שוחזר יחדיו ▪ כובע1, שיתוף כובע ▪ כובע1, כיבוי אנזימטי |
5' UTR/3' UTR |
▪ סדרת UTR טבעית ▪ סדרת UTR מוטante/מעוצבת |
זנב PolyA 3' |
▪ זנב של 100A ~120A (מומלץ) ▪ זנב polyA מחולק ▪ זנבות מותאמים נוספים |
נוקלאוזידים מודיפי |
▪ בסיסים לא מודיפיקטים ▪ פסיאודורידין (Ψ) ▪ N1-מetylפסיאודורידין (N1Ψ) ▪ 5-מธילציטוזין (m5C) ▪ 5-מתילאורידין (m5U) ▪ 5-מתוקסיאורידין (5moU) ▪ אורידין 2-תאי (s2U) ▪ 2′-O-מetyl-U ▪ מודיפיקציות אחרות |
תהליך שרות משלב
הצgarya סדרה של שירותים החל מעיצוב סדרת הקדימה ועד להכנת mRNA בצד האחורי, בקרת איכות ותיעוד ביטוי.
עיצוב סדרה חותכת קדימה בינלאומית
עיצוב והערכה מקצועית של סדרת mRNA תומכים בביטוי יעיל של mRNA.
השחתות מגוונות של נוקליאוטידים
מגדילים בצורה יעילה את הביטוי של mRNA ומפחיתים תגובות חיסוניות שליליות של mRNA.
פלטפורמה מתקדמת לטיהור
באמצעות שילוב של שיטת טיהור מסורתית ושיטת טיהור מותאמת אישית, מקבלים דגימות mRNA עם טהרה גבוהה.
פלטפורמה של בקרת איכות מלאה
הרחבה של אפשרויות בקרת איכות כדי לענות על הדרישות של בדיקות רגילות, כמו ריכוז, טהרת A260/280 ושלמות, וכן דרישות גבוהות של בקרת איכות, כמו יעילות כובע/התפלגות polyA.
משלוח מהיר
MRNA מותאמת אישית יכולה להיות מוסגרת תוך 7 ימים בלבד, פרט לתהליך חיצוני של סינתזה של סדרה.