MRNA מעגלית (circRNA) נמצאת בשימוש רחבי היקף במחקר על תפקודיהם של גנים או חלבונים.emás, היא מקובלת לפיתוח מוצרים ביולוגיים תרפיים ומנעתיים, דומים ל-mRNA.
Yaohai Bio-Pharma הקימה סדרה של טכנולוגיות להרכבת circRNA כדי לספק RNA באיכות גבוהה, כמו תכנון וoptimization של הסדרה, הרכבה חלונית (IVT), מעגלת/סיבוב, טיהור וטיפוס בתוך חלקיקים ננוטכנולוגיים שומניים (LNP). כל המוצרים משוחררים תחת תקן איכות (QC) מחמיר.
בשונה מ-mRNA ליניארי, RNA מעגלי (circRNA) הוא יציב יותר מבנה ועומד במרכז המחקר הנוכחי על תרופות חומצות גרעיניות. יש לו טווח רחב של יישומים בתחומים שונים, בין אם כ-circRNA קודי או לא-קודי, כולל חיסונים אפיגים למניעת מחלות זיהומיות, חיסוני סרטןoterpy, תרופות לטיפול בסרטן, תרפיית החלפת חלבונים, רפואה רגנרטיבית, תרפיית תאים וגנים (CGT), תפקיד של ספוג מולקולרי ו-RNA אפטמר.
תַהֲלִיך | שירות אופציונלית | פרטי שירות | תקופת הובלה (יום) |
עיצוב והאצה של סדרה circRNA | עיצוב ותאמה של סדרות קידודיות | הופטימיזציה של קדון CDS | 1 |
עיצוב ותיכנון של סדרות לא-קודדות | עיצוב והאצה של סדרה של אינטרון ואקסון, זרועות הומולוגיות וספייסרים | 1-2 | |
הכנה של פלסמיד מעגלי | סינתזה גנונית | סינתזה של גן (של צד שלישי) | 7-10 |
הגדלת פלזמיד | הגדלת פלזמיד | 2 | |
הפרדת פלזמיד | |||
הכנה של פלזמיד ליניארי | ליניאריזציה וטהרה של פלסמיד | ליניאריזציה של פלזמיד | 1 |
טהור DNA לאחר ליניאריזציה | |||
תעתוע חיצוני וסיקליזציה | תעתוע חיצוני וסיקליזציה | תגובות של תעתוע חיצוני וסיקליזציה | 1-2 |
הידוש על ידי RNase R | |||
אופטימיזציה - אופציונלית | תרכובת תגובה, אופטימיזציה של זמן | 2-5 | |
טיהור circRNA | שיטה מסורתית לטיהור | השחתת ליתيوم כלוריד | 1 |
הפרדת כדוריות מגנטיות | 1 | ||
טיהור circRNA מדויק במיוחד | כרומטוגרפיה נוזלית ביצועים גבוהים (HPLC) תכניתית | 1-2 | |
החלפת בופר | אולטרה פילטרציה | 1 | |
ליפופיליזציה של circRNA | מילוי דגימה | מילוי | 2-3 |
ליאופיליזציה | קפיאה מוקדמת | ||
יובש ראשוני (סובליימציה) | |||
יובש שניוני (דיסורבציה) | |||
הכלאת circRNA-ליפוסום | הכפפת LNP | טיפול מקדים בחומר ווזה | 2 |
ערבוב במכשיר מיקרופלואידיק | |||
החלפת בופר | סינון זרימה משולבת | 1 | |
סטרילי | סינון | ||
בקרת איכות של DNA פלזמיד | עומס/נקיון | ספקטרופוטומטריה אולטרה-סגול (UV) | 1-2 |
צורת פלזמיד | אלקטרופורזה בגל אגרוז (AGE) | ||
אלקטרופורזיס קפילרית (CE) - אופציונלי | |||
היכרות עם פלזמיד | זיהוי אנזים מגבילי/AGE | ||
בקרת איכות של circRNA | עומס/נקיון | ספקטרופוטומטריה אולטרה-סגול (UV) | - |
טוהר | אלקטרופורזיס בגל אגרוז (AGE)/E-Gel | 0.5 | |
HPLC-אופציונלי | 1 | ||
שליטה באיכות של circRNA-LNP | יעילות אינקפסולציה | שיטת RiboGreen | 1 |
גודל חלקיקים | פיזור אור דינמי (DLS) | 1 | |
אינדקס פולידיספרסיביות | פיזור אור דינמי (DLS) | 1 | |
פוטנציאל זטה | פיזור אור דינמי (DLS) | 1 | |
מבחן עוצמה תאי | הובלה לתאים | הכנת תאים, הובלת תאים | 4 |
גילוי חלבון מטרה | צפייה בפלורסצנטית, בלוטת מערבית/ELISA | 1-3 |
הנחנו את circRNA של חלבון פלורסנטי ירוק מוגבר (eGFP circRNA), mCherry circRNA, luciferase circRNA לתאים 293T, וגילינו את החלבון המטרה באמצעות אות פלורסצנטי, מאור או צבעי, בלוטת מערבית (WB), ו-ELISA (אנזים קשור לניסוי חיסוני).
מבחני עוצמה תאית של דגימות circRNA על ידי Yaohai Bio-Pharma